中华病理学杂志
中華病理學雜誌
중화병이학잡지
Chinese Journal of Pathology
2001年
4期
276-279
,共4页
李皓%尹鸿操%张华%王宗立%佘铭鹏
李皓%尹鴻操%張華%王宗立%佘銘鵬
리호%윤홍조%장화%왕종립%사명붕
血管紧张素Ⅱ%内皮,血管%NF-κB%血小板源生长因子
血管緊張素Ⅱ%內皮,血管%NF-κB%血小闆源生長因子
혈관긴장소Ⅱ%내피,혈관%NF-κB%혈소판원생장인자
目的研究血管紧张素Ⅱ对ECV304细胞中转录因子NF-κB的作用和对血小板源生长因子B链(PDGF-B)基因表达的影响.方法采用电泳迁移率移动分析法(EMSA),免疫组织化学方法,共聚焦显微镜及金颗粒标记免疫电镜技术;荧光素酶报告基因与变异型激酶质粒共转染的方法及Northern印迹法研究血管紧张素Ⅱ激活ECV304细胞NF-κB的信号传递路径和检测了血管紧张素Ⅱ刺激前后ECV304细胞PDGF-B mRNA的表达水平.结果血管紧张素Ⅱ刺激后,在ECV304细胞内有NF-κB的激活及核易位过程,应用免疫荧光共聚焦显微镜,免疫电镜及Northern 印迹等方法均可观察到PDGF-B或其基因表达增高.变异型激酶质粒IKKα-KM,IKKβ-KM及NIK-Km可抑制经血管紧张素Ⅱ刺激的转染细胞内与NF-κB启动相连的荧光素酶的表达.结论血管紧张素Ⅱ可激活胞质内NF-κB并出现核易位,激酶NIK、IKKα和IKKβ参与了此信号传递路径.血管紧张素Ⅱ刺激后PDGF-B链mRNA水平增高.
目的研究血管緊張素Ⅱ對ECV304細胞中轉錄因子NF-κB的作用和對血小闆源生長因子B鏈(PDGF-B)基因錶達的影響.方法採用電泳遷移率移動分析法(EMSA),免疫組織化學方法,共聚焦顯微鏡及金顆粒標記免疫電鏡技術;熒光素酶報告基因與變異型激酶質粒共轉染的方法及Northern印跡法研究血管緊張素Ⅱ激活ECV304細胞NF-κB的信號傳遞路徑和檢測瞭血管緊張素Ⅱ刺激前後ECV304細胞PDGF-B mRNA的錶達水平.結果血管緊張素Ⅱ刺激後,在ECV304細胞內有NF-κB的激活及覈易位過程,應用免疫熒光共聚焦顯微鏡,免疫電鏡及Northern 印跡等方法均可觀察到PDGF-B或其基因錶達增高.變異型激酶質粒IKKα-KM,IKKβ-KM及NIK-Km可抑製經血管緊張素Ⅱ刺激的轉染細胞內與NF-κB啟動相連的熒光素酶的錶達.結論血管緊張素Ⅱ可激活胞質內NF-κB併齣現覈易位,激酶NIK、IKKα和IKKβ參與瞭此信號傳遞路徑.血管緊張素Ⅱ刺激後PDGF-B鏈mRNA水平增高.
목적연구혈관긴장소Ⅱ대ECV304세포중전록인자NF-κB적작용화대혈소판원생장인자B련(PDGF-B)기인표체적영향.방법채용전영천이솔이동분석법(EMSA),면역조직화학방법,공취초현미경급금과립표기면역전경기술;형광소매보고기인여변이형격매질립공전염적방법급Northern인적법연구혈관긴장소Ⅱ격활ECV304세포NF-κB적신호전체로경화검측료혈관긴장소Ⅱ자격전후ECV304세포PDGF-B mRNA적표체수평.결과혈관긴장소Ⅱ자격후,재ECV304세포내유NF-κB적격활급핵역위과정,응용면역형광공취초현미경,면역전경급Northern 인적등방법균가관찰도PDGF-B혹기기인표체증고.변이형격매질립IKKα-KM,IKKβ-KM급NIK-Km가억제경혈관긴장소Ⅱ자격적전염세포내여NF-κB계동상련적형광소매적표체.결론혈관긴장소Ⅱ가격활포질내NF-κB병출현핵역위,격매NIK、IKKα화IKKβ삼여료차신호전체로경.혈관긴장소Ⅱ자격후PDGF-B련mRNA수평증고.
