中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2008年
11期
999-1004
,共6页
方立%王慷慨%蒋磊%蒋碧梅%韦星%宋岚%邓恭华%肖献忠
方立%王慷慨%蔣磊%蔣碧梅%韋星%宋嵐%鄧恭華%肖獻忠
방립%왕강개%장뢰%장벽매%위성%송람%산공화%초헌충
核仁素%THP-1单核细胞%脂多糖%炎症因子%基因表达
覈仁素%THP-1單覈細胞%脂多糖%炎癥因子%基因錶達
핵인소%THP-1단핵세포%지다당%염증인자%기인표체
目的:观察人THP-1细胞膜表面核仁素对脂多糖(LPS)所致TNF-α和IL-β表达的影响.方法:采用免疫荧光、免疫印迹等方法观察核仁素在THP-1细胞膜表面表达.利用抗体封闭策略使膜表面核仁素失活,以LPS刺激THP-1细胞的炎症细胞模型,采用逆转录PCR和酶联免疫吸附实验观察炎症因子TNF-α和IL-1β的表达与分泌.结果:免疫荧光结果显示核仁素呈斑点状位于细胞膜表面;免疫印迹检测显示核仁素和Fas存在于THP-1细胞膜蛋白中.逆转录PCR结果显示LPS(1 000μ/L)处理1,2,3,4 h后,IL-1β和TNF-αmRNA均表达上调,而核仁素抗体封闭明显抑制二者的表达.酶联免疫吸附检测发现,LPS(1 mg/L)刺激4,12,24 h后,促进THP-1细胞分泌TNF-α和IL-1β,而核仁素抗体封闭显著抑制LPS所致的炎症因子释放(P<0.05).结论:THP-1细胞膜表面核仁素参与介导LPS所致早期炎症介质IL-1β和TNF-α的表达与分泌.
目的:觀察人THP-1細胞膜錶麵覈仁素對脂多糖(LPS)所緻TNF-α和IL-β錶達的影響.方法:採用免疫熒光、免疫印跡等方法觀察覈仁素在THP-1細胞膜錶麵錶達.利用抗體封閉策略使膜錶麵覈仁素失活,以LPS刺激THP-1細胞的炎癥細胞模型,採用逆轉錄PCR和酶聯免疫吸附實驗觀察炎癥因子TNF-α和IL-1β的錶達與分泌.結果:免疫熒光結果顯示覈仁素呈斑點狀位于細胞膜錶麵;免疫印跡檢測顯示覈仁素和Fas存在于THP-1細胞膜蛋白中.逆轉錄PCR結果顯示LPS(1 000μ/L)處理1,2,3,4 h後,IL-1β和TNF-αmRNA均錶達上調,而覈仁素抗體封閉明顯抑製二者的錶達.酶聯免疫吸附檢測髮現,LPS(1 mg/L)刺激4,12,24 h後,促進THP-1細胞分泌TNF-α和IL-1β,而覈仁素抗體封閉顯著抑製LPS所緻的炎癥因子釋放(P<0.05).結論:THP-1細胞膜錶麵覈仁素參與介導LPS所緻早期炎癥介質IL-1β和TNF-α的錶達與分泌.
목적:관찰인THP-1세포막표면핵인소대지다당(LPS)소치TNF-α화IL-β표체적영향.방법:채용면역형광、면역인적등방법관찰핵인소재THP-1세포막표면표체.이용항체봉폐책략사막표면핵인소실활,이LPS자격THP-1세포적염증세포모형,채용역전록PCR화매련면역흡부실험관찰염증인자TNF-α화IL-1β적표체여분비.결과:면역형광결과현시핵인소정반점상위우세포막표면;면역인적검측현시핵인소화Fas존재우THP-1세포막단백중.역전록PCR결과현시LPS(1 000μ/L)처리1,2,3,4 h후,IL-1β화TNF-αmRNA균표체상조,이핵인소항체봉폐명현억제이자적표체.매련면역흡부검측발현,LPS(1 mg/L)자격4,12,24 h후,촉진THP-1세포분비TNF-α화IL-1β,이핵인소항체봉폐현저억제LPS소치적염증인자석방(P<0.05).결론:THP-1세포막표면핵인소삼여개도LPS소치조기염증개질IL-1β화TNF-α적표체여분비.
