中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2008年
6期
729-732
,共4页
芋螺毒素%镇痛%钙离子通道%GST
芋螺毒素%鎮痛%鈣離子通道%GST
우라독소%진통%개리자통도%GST
目的 构建芋螺毒素MⅦA基因的融合表达质粒pGEX-2T/CTX MⅦA在大肠杆菌中表达,并对融合蛋白的镇痛活性进行测定.方法 根据芋螺毒素MⅦA的氨基酸序列,按大肠杆菌偏爱密码子化学合成CTX MⅦA基因.把合成的CTX MⅦA基因克隆到谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX-2T中,构建质粒pGEX-2T/CTX MⅦA.将此质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后获得融合蛋白GST-CTX MⅦA,用谷胱甘肽偶联的Sepharose 4B柱对融合蛋白进行纯化.热板法测定其对小鼠的镇痛活性.结果 获得的融合蛋白GST-CTX MⅦA使小鼠疼痛阈值有显著提高.结论 基因工程产生的GST-CTX MⅦA融合蛋白具有明显的镇痛活性,且镇痛活性具有浓度依赖性,可以为进一步的科研及临床应用开辟新的途径.
目的 構建芋螺毒素MⅦA基因的融閤錶達質粒pGEX-2T/CTX MⅦA在大腸桿菌中錶達,併對融閤蛋白的鎮痛活性進行測定.方法 根據芋螺毒素MⅦA的氨基痠序列,按大腸桿菌偏愛密碼子化學閤成CTX MⅦA基因.把閤成的CTX MⅦA基因剋隆到穀胱甘肽S-轉移酶(GST)融閤蛋白錶達載體pGEX-2T中,構建質粒pGEX-2T/CTX MⅦA.將此質粒轉化大腸桿菌BL21,經IPTG誘導後穫得融閤蛋白GST-CTX MⅦA,用穀胱甘肽偶聯的Sepharose 4B柱對融閤蛋白進行純化.熱闆法測定其對小鼠的鎮痛活性.結果 穫得的融閤蛋白GST-CTX MⅦA使小鼠疼痛閾值有顯著提高.結論 基因工程產生的GST-CTX MⅦA融閤蛋白具有明顯的鎮痛活性,且鎮痛活性具有濃度依賴性,可以為進一步的科研及臨床應用開闢新的途徑.
목적 구건우라독소MⅦA기인적융합표체질립pGEX-2T/CTX MⅦA재대장간균중표체,병대융합단백적진통활성진행측정.방법 근거우라독소MⅦA적안기산서렬,안대장간균편애밀마자화학합성CTX MⅦA기인.파합성적CTX MⅦA기인극륭도곡광감태S-전이매(GST)융합단백표체재체pGEX-2T중,구건질립pGEX-2T/CTX MⅦA.장차질립전화대장간균BL21,경IPTG유도후획득융합단백GST-CTX MⅦA,용곡광감태우련적Sepharose 4B주대융합단백진행순화.열판법측정기대소서적진통활성.결과 획득적융합단백GST-CTX MⅦA사소서동통역치유현저제고.결론 기인공정산생적GST-CTX MⅦA융합단백구유명현적진통활성,차진통활성구유농도의뢰성,가이위진일보적과연급림상응용개벽신적도경.
