CAJ | 학술논문

蜕皮激素对昆虫生长、发育和繁殖有重要调控作用,尤其对蜕皮和变态过程.利用GenBank上登录的蜕皮激素C26羟基化酶候选基因CYP18A1的氨基酸序列对家蚕Bombyx mori全基因组数据库进行BLASTP比对,发现了家蚕直向同源基因(ortholog),其完全编码序列经RT-PCR检测和克隆、测序验证后,再以此为信息探针检索家蚕表达序列标签(expressed sequence tags,EST)数据库进行拼接延伸,获得了一条包括5'非翻译区在内的长度为1 737 bp的cDNA序列,验证结果也表明与电子克隆序列完全一致(GenBank登录号为EF421988,P450命名委员会将其命名为CYP18A1).该基因的开放阅读框为1 623 bp,编码541个氨基酸,含有包括P450s特征结构域在内的所有昆虫P450基因的5个保守结构域,其推定的分子量为61.67 kD,等电点为8.54.将该基因cDNA序列与家蚕基因组序列进行比对,结果表明该基因具有6个外显子,5个内含子,外显子/内含子边界符合经典的GT-AG规则.同源性分析也发现家蚕CYP18A1与其他昆虫的直向同源基因具有较高相似性.用RT-PCR方法对家蚕主要发育变态时期与组织进行检测,显示出该基因的转录表达不仅具有时空特异性,而且在表达时期上与已报道的蚕体内蜕皮激素含量变化有紧密的一致性.该研究进一步证实了CYP18A1基因与昆虫体内蜕皮激素代谢平衡相关联.
세피격소대곤충생장、발육화번식유중요조공작용,우기대세피화변태과정.이용GenBank상등록적세피격소C26간기화매후선기인CYP18A1적안기산서렬대가잠Bombyx mori전기인조수거고진행BLASTP비대,발현료가잠직향동원기인(ortholog),기완전편마서렬경RT-PCR검측화극륭、측서험증후,재이차위신식탐침검색가잠표체서렬표첨(expressed sequence tags,EST)수거고진행병접연신,획득료일조포괄5'비번역구재내적장도위1 737 bp적cDNA서렬,험증결과야표명여전자극륭서렬완전일치(GenBank등록호위EF421988,P450명명위원회장기명명위CYP18A1).해기인적개방열독광위1 623 bp,편마541개안기산,함유포괄P450s특정결구역재내적소유곤충P450기인적5개보수결구역,기추정적분자량위61.67 kD,등전점위8.54.장해기인cDNA서렬여가잠기인조서렬진행비대,결과표명해기인구유6개외현자,5개내함자,외현자/내함자변계부합경전적GT-AG규칙.동원성분석야발현가잠CYP18A1여기타곤충적직향동원기인구유교고상사성.용RT-PCR방법대가잠주요발육변태시기여조직진행검측,현시출해기인적전록표체불부구유시공특이성,이차재표체시기상여이보도적잠체내세피격소함량변화유긴밀적일치성.해연구진일보증실료CYP18A1기인여곤충체내세피격소대사평형상관련.