中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2007年
6期
1173-1176
,共4页
p53基因%AS基因%联合转染%白血病
p53基因%AS基因%聯閤轉染%白血病
p53기인%AS기인%연합전염%백혈병
本研究观察联合转染p53、血管生成抑素(angiostattn,AS)基因对人K562细胞的抑制作用,并初步探讨其机制.用脂质体转染法将pVITRO2-hp53-hAS转染K562细胞17天后,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过MTT生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变;用细胞免疫化学观察VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达差异.结果表明:转染成功后目的基因在细胞中获得稳定表达,目的基因转染组细胞上升幅度均比空载体转染组细胞低(p＜0.05),且双基因组细胞上升幅度(最后1天的A290 nm值0.264±0.011)比p53组(最后1天的A290 nm值0.652±0.039)和AS组(最后1天的A290 nm值0.604±0.017)低(p＜0.05).转染后,VEGF和Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达加强.结论:联合转染p53和AS基因对K562细胞增殖有较强的抑制作用,且比单独转染组作用强,两者协同作用的机制可能是共同影响bcl-2、bax表达的途径.
本研究觀察聯閤轉染p53、血管生成抑素(angiostattn,AS)基因對人K562細胞的抑製作用,併初步探討其機製.用脂質體轉染法將pVITRO2-hp53-hAS轉染K562細胞17天後,以RT-PCR法檢測轉染後細胞目的基因的錶達,通過MTT生長麯線、流式細胞術檢測細胞週期來觀察細胞生物學改變;用細胞免疫化學觀察VEGF、Bcl-2、Bax蛋白錶達差異.結果錶明:轉染成功後目的基因在細胞中穫得穩定錶達,目的基因轉染組細胞上升幅度均比空載體轉染組細胞低(p＜0.05),且雙基因組細胞上升幅度(最後1天的A290 nm值0.264±0.011)比p53組(最後1天的A290 nm值0.652±0.039)和AS組(最後1天的A290 nm值0.604±0.017)低(p＜0.05).轉染後,VEGF和Bcl-2蛋白錶達減弱,Bax蛋白錶達加彊.結論:聯閤轉染p53和AS基因對K562細胞增殖有較彊的抑製作用,且比單獨轉染組作用彊,兩者協同作用的機製可能是共同影響bcl-2、bax錶達的途徑.
본연구관찰연합전염p53、혈관생성억소(angiostattn,AS)기인대인K562세포적억제작용,병초보탐토기궤제.용지질체전염법장pVITRO2-hp53-hAS전염K562세포17천후,이RT-PCR법검측전염후세포목적기인적표체,통과MTT생장곡선、류식세포술검측세포주기래관찰세포생물학개변;용세포면역화학관찰VEGF、Bcl-2、Bax단백표체차이.결과표명:전염성공후목적기인재세포중획득은정표체,목적기인전염조세포상승폭도균비공재체전염조세포저(p＜0.05),차쌍기인조세포상승폭도(최후1천적A290 nm치0.264±0.011)비p53조(최후1천적A290 nm치0.652±0.039)화AS조(최후1천적A290 nm치0.604±0.017)저(p＜0.05).전염후,VEGF화Bcl-2단백표체감약,Bax단백표체가강.결론:연합전염p53화AS기인대K562세포증식유교강적억제작용,차비단독전염조작용강,량자협동작용적궤제가능시공동영향bcl-2、bax표체적도경.
