中国中西医结合急救杂志
中國中西醫結閤急救雜誌
중국중서의결합급구잡지
INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE IN PRACTICE OF CRITICAL CARE MEDICINE
2007年
5期
309-312
,共4页
张勉之%赵松%段建召%陈炼%赵姜%左春霞%程项阳
張勉之%趙鬆%段建召%陳煉%趙薑%左春霞%程項暘
장면지%조송%단건소%진련%조강%좌춘하%정항양
糖尿病肾病%肾小管上皮细胞%转分化%转化生长因子-β1
糖尿病腎病%腎小管上皮細胞%轉分化%轉化生長因子-β1
당뇨병신병%신소관상피세포%전분화%전화생장인자-β1
目的:观察Janus酪氨酸蛋白激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)信号转导途径在糖尿病肾病肾小管上皮细胞中的表达.方法:将体外培养的人肾近曲小管上皮细胞株(HKC)随机分为高糖组(30 mmol/L)、低糖组(5.5 mmol/L)和低糖+甘露醇组(糖5.5 mmol/L+甘露醇24.5 mmol/L).采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定HKC细胞上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原的分泌;蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-cadherin)及信号蛋白STAT1、STAT3、磷酸化-STAT1(p-STAT1)和p-STAT3的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA表达.结果:与低糖组比较,高糖组不同时间点细胞培养上清液中TGF-β1、Ⅰ型胶原分泌明显增加(P均＜0.01) HKC中p-STAT1和p-STAT3的蛋白及TGF-β1 mRNA表达自6 h起明显增加,至48 h达最高,72 h有所回落,而STAT1和STAT3在各时间点差异无显著性;HKC中α-SMA表达随刺激时间延长明显升高,E-cadherin表达明显下调(P均＜0.01).结论:JAK参与高糖诱导的HKC转分化,并刺激TGF-β1和细胞外基质的分泌.
目的:觀察Janus酪氨痠蛋白激酶/信號轉導子和轉錄激活子(JAK/STAT)信號轉導途徑在糖尿病腎病腎小管上皮細胞中的錶達.方法:將體外培養的人腎近麯小管上皮細胞株(HKC)隨機分為高糖組(30 mmol/L)、低糖組(5.5 mmol/L)和低糖+甘露醇組(糖5.5 mmol/L+甘露醇24.5 mmol/L).採用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定HKC細胞上清液中轉化生長因子-β1(TGF-β1)和Ⅰ型膠原的分泌;蛋白質免疫印跡法(Western blotting)檢測平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、E-鈣黏素(E-cadherin)及信號蛋白STAT1、STAT3、燐痠化-STAT1(p-STAT1)和p-STAT3的錶達;逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測TGF-β1 mRNA錶達.結果:與低糖組比較,高糖組不同時間點細胞培養上清液中TGF-β1、Ⅰ型膠原分泌明顯增加(P均＜0.01) HKC中p-STAT1和p-STAT3的蛋白及TGF-β1 mRNA錶達自6 h起明顯增加,至48 h達最高,72 h有所迴落,而STAT1和STAT3在各時間點差異無顯著性;HKC中α-SMA錶達隨刺激時間延長明顯升高,E-cadherin錶達明顯下調(P均＜0.01).結論:JAK參與高糖誘導的HKC轉分化,併刺激TGF-β1和細胞外基質的分泌.
목적:관찰Janus락안산단백격매/신호전도자화전록격활자(JAK/STAT)신호전도도경재당뇨병신병신소관상피세포중적표체.방법:장체외배양적인신근곡소관상피세포주(HKC)수궤분위고당조(30 mmol/L)、저당조(5.5 mmol/L)화저당+감로순조(당5.5 mmol/L+감로순24.5 mmol/L).채용매련면역흡부법(ELISA)측정HKC세포상청액중전화생장인자-β1(TGF-β1)화Ⅰ형효원적분비;단백질면역인적법(Western blotting)검측평활기기동단백(α-SMA)、E-개점소(E-cadherin)급신호단백STAT1、STAT3、린산화-STAT1(p-STAT1)화p-STAT3적표체;역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측TGF-β1 mRNA표체.결과:여저당조비교,고당조불동시간점세포배양상청액중TGF-β1、Ⅰ형효원분비명현증가(P균＜0.01) HKC중p-STAT1화p-STAT3적단백급TGF-β1 mRNA표체자6 h기명현증가,지48 h체최고,72 h유소회락,이STAT1화STAT3재각시간점차이무현저성;HKC중α-SMA표체수자격시간연장명현승고,E-cadherin표체명현하조(P균＜0.01).결론:JAK삼여고당유도적HKC전분화,병자격TGF-β1화세포외기질적분비.
