中国农业科学
中國農業科學
중국농업과학
SCIENTIA AGRICULTURA SINICA
2007年
9期
1849-1855
,共7页
李轶女%孙丙耀%苏宁%孟祥勋%张志芳%沈桂芳
李軼女%孫丙耀%囌寧%孟祥勛%張誌芳%瀋桂芳
리질녀%손병요%소저%맹상훈%장지방%침계방
水稻%同源片段%bar基因%叶绿体转化
水稻%同源片段%bar基因%葉綠體轉化
수도%동원편단%bar기인%협록체전화
[目的]建立外源基因在水稻叶绿体中的表达体系.[方法]通过分析已公布的水稻叶绿体基因组全序列及其基因分布特点,选择ndhF与trnL的基因间序列作为除草剂PPT抗性基因bar定点整合的位点.以水稻叶绿体基因组DNA为模板,采用PCR方法克隆了两个适于水稻叶绿体基因组遗传转化的同源片段,构建了含水稻叶绿体16S高效表达启动子、外源基因bar、psbA基因的3′序列(终止子)以及两个同源片段的水稻叶绿体特异表达载体pRB.[结果]采用基因枪法转化水稻品种中花10号幼穗诱导的愈伤组织,并再生植株,获得转化体后代种子.对转化植株进行的分子检测结果表明,外源基因bar 可能被整合到水稻叶绿体基因组中.后代种子的遗传学分析显示,外源基因bar可正常表达并遗传.[结论]利用所建立的水稻叶绿体外源基因表达体系,外源基因bar既可在水稻叶绿体基因组中正常表达,还可作为转化体筛选时的除草剂抗性选择标记.
[目的]建立外源基因在水稻葉綠體中的錶達體繫.[方法]通過分析已公佈的水稻葉綠體基因組全序列及其基因分佈特點,選擇ndhF與trnL的基因間序列作為除草劑PPT抗性基因bar定點整閤的位點.以水稻葉綠體基因組DNA為模闆,採用PCR方法剋隆瞭兩箇適于水稻葉綠體基因組遺傳轉化的同源片段,構建瞭含水稻葉綠體16S高效錶達啟動子、外源基因bar、psbA基因的3′序列(終止子)以及兩箇同源片段的水稻葉綠體特異錶達載體pRB.[結果]採用基因鎗法轉化水稻品種中花10號幼穗誘導的愈傷組織,併再生植株,穫得轉化體後代種子.對轉化植株進行的分子檢測結果錶明,外源基因bar 可能被整閤到水稻葉綠體基因組中.後代種子的遺傳學分析顯示,外源基因bar可正常錶達併遺傳.[結論]利用所建立的水稻葉綠體外源基因錶達體繫,外源基因bar既可在水稻葉綠體基因組中正常錶達,還可作為轉化體篩選時的除草劑抗性選擇標記.
[목적]건립외원기인재수도협록체중적표체체계.[방법]통과분석이공포적수도협록체기인조전서렬급기기인분포특점,선택ndhF여trnL적기인간서렬작위제초제PPT항성기인bar정점정합적위점.이수도협록체기인조DNA위모판,채용PCR방법극륭료량개괄우수도협록체기인조유전전화적동원편단,구건료함수도협록체16S고효표체계동자、외원기인bar、psbA기인적3′서렬(종지자)이급량개동원편단적수도협록체특이표체재체pRB.[결과]채용기인창법전화수도품충중화10호유수유도적유상조직,병재생식주,획득전화체후대충자.대전화식주진행적분자검측결과표명,외원기인bar 가능피정합도수도협록체기인조중.후대충자적유전학분석현시,외원기인bar가정상표체병유전.[결론]이용소건립적수도협록체외원기인표체체계,외원기인bar기가재수도협록체기인조중정상표체,환가작위전화체사선시적제초제항성선택표기.
