人FAT10蛋白过表达诱导饥饿状态下HEK 293细胞发生凋亡
인FAT10단백과표체유도기아상태하HEK 293세포발생조망
Overexpressed human FAT10 protein induces the apoptosis in the starved HEK293 cells
  • 万方数据
    中国病理生理杂志 중국병리생리잡지
    CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
    2007年 10期 1937-1941 ,共5页

    刘亚伟%刘靖华%谢汝佳%李志杰%王国军%黄劭%唐靖%赵明哲%孙学刚%邓鹏%姜勇

    류아위%류정화%사여가%리지걸%왕국군%황소%당정%조명철%손학강%산붕%강용

    泛素样修饰因子%HEK293细胞%细胞凋亡 汎素樣脩飾因子%HEK293細胞%細胞凋亡
    범소양수식인자%HEK293세포%세포조망
    目的:采用flag标记的人FAT10蛋白研究人FAT10蛋白对HEK293细胞的影响.方法:将FAT10基因片段克隆到载体pcDNA3-flag上,对阳性克隆进行PCR、酶切和测序鉴定,用脂质体转染HEK293细胞,用Western blotting方法检测外源性FAT10正常培养状态和饥饿状态下的HEK293细胞中的表达情况;并用XTT法和DNA ladder法观察正常培养和饥饿状态下HEK293细胞的凋亡情况.结果:重组质粒在HEK293细胞中高效表达,但在正常培养状态下和饥饿状态下表达情况不同.饥饿状态下,过表达FAT10的HEK293细胞存活率显著低于对照细胞,并且出现DNA ladder现象.结论:成功构建了带Flag标签的FAT10真核表达质粒,可在HEK293细胞中高效表达;FAT10过表达促进饥饿状态的HEK293细胞发生凋亡.
    목적:채용flag표기적인FAT10단백연구인FAT10단백대HEK293세포적영향.방법:장FAT10기인편단극륭도재체pcDNA3-flag상,대양성극륭진행PCR、매절화측서감정,용지질체전염HEK293세포,용Western blotting방법검측외원성FAT10정상배양상태화기아상태하적HEK293세포중적표체정황;병용XTT법화DNA ladder법관찰정상배양화기아상태하HEK293세포적조망정황.결과:중조질립재HEK293세포중고효표체,단재정상배양상태하화기아상태하표체정황불동.기아상태하,과표체FAT10적HEK293세포존활솔현저저우대조세포,병차출현DNA ladder현상.결론:성공구건료대Flag표첨적FAT10진핵표체질립,가재HEK293세포중고효표체;FAT10과표체촉진기아상태적HEK293세포발생조망.
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