中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2003年
3期
249-251
,共3页
肖少波%方六荣%徐建祥%洪文洲%陈焕春
肖少波%方六榮%徐建祥%洪文洲%陳煥春
초소파%방륙영%서건상%홍문주%진환춘
伪狂犬病病毒%IE180基因%克隆%表达
偽狂犬病病毒%IE180基因%剋隆%錶達
위광견병병독%IE180기인%극륭%표체
提取伪狂犬病病毒国内地方分离株Ea株基因组DNA,BamH I酶切后回收4.8kb左右的片段,克隆到pUC18中,酶切分析和部分序列测定筛选到含IE180基因的重组质粒pUCIE.进一步将长约1.8kb的IE180基因5′端部分编码区亚片段克隆到原核表达载体pET-28a中,使其置于pET-28a的T7启动子下游并同6×His(多聚组氨酸标签)-Tag融合,重组表达质粒pET1.8转化BL21(DE3),在IPTG诱导下获得高效表达,表达产物以包涵体形式存在,相对分子质量为62 000,同预期大小相当,并能同抗6×His的抗体发生特异性反应.
提取偽狂犬病病毒國內地方分離株Ea株基因組DNA,BamH I酶切後迴收4.8kb左右的片段,剋隆到pUC18中,酶切分析和部分序列測定篩選到含IE180基因的重組質粒pUCIE.進一步將長約1.8kb的IE180基因5′耑部分編碼區亞片段剋隆到原覈錶達載體pET-28a中,使其置于pET-28a的T7啟動子下遊併同6×His(多聚組氨痠標籤)-Tag融閤,重組錶達質粒pET1.8轉化BL21(DE3),在IPTG誘導下穫得高效錶達,錶達產物以包涵體形式存在,相對分子質量為62 000,同預期大小相噹,併能同抗6×His的抗體髮生特異性反應.
제취위광견병병독국내지방분리주Ea주기인조DNA,BamH I매절후회수4.8kb좌우적편단,극륭도pUC18중,매절분석화부분서렬측정사선도함IE180기인적중조질립pUCIE.진일보장장약1.8kb적IE180기인5′단부분편마구아편단극륭도원핵표체재체pET-28a중,사기치우pET-28a적T7계동자하유병동6×His(다취조안산표첨)-Tag융합,중조표체질립pET1.8전화BL21(DE3),재IPTG유도하획득고효표체,표체산물이포함체형식존재,상대분자질량위62 000,동예기대소상당,병능동항6×His적항체발생특이성반응.
