中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2007年
9期
899-902,906
,共5页
柳斌%李文平%屈孝初%唐宇龙%张传福%周晓巍%黄培堂
柳斌%李文平%屈孝初%唐宇龍%張傳福%週曉巍%黃培堂
류빈%리문평%굴효초%당우룡%장전복%주효외%황배당
NP基因%诱饵载体%酵母双杂交%自激活作用
NP基因%誘餌載體%酵母雙雜交%自激活作用
NP기인%유이재체%효모쌍잡교%자격활작용
目的 构建H5N1亚型禽流感病毒NP基因的酵母双杂交诱饵载体,验证其在酵母中的表达并检测其自激活作用.方法以PCR法从pGEMT/H5NP扩增NP基因编码区序列,将其定向克隆到PGBKT7载体,经测序鉴定后,PEG/LiAc法转化酵母菌株AH109,用表型筛选法及颜色筛选法检测其自激活作用同时Western blot验证诱饵蛋白的表达.结果获得NP编码区基因,并成功构建酵母双杂交系统中的诱饵载体pGBKT7-NP,对宿主细胞酵母菌株AH109无毒性和自激活作用,并能在酵母细胞中稳定表达.结论诱饵载体pGBKT7-NP可用于GAL4酵母双杂交系统钓取与禽流感病毒核蛋白相互作用的蛋白.
目的 構建H5N1亞型禽流感病毒NP基因的酵母雙雜交誘餌載體,驗證其在酵母中的錶達併檢測其自激活作用.方法以PCR法從pGEMT/H5NP擴增NP基因編碼區序列,將其定嚮剋隆到PGBKT7載體,經測序鑒定後,PEG/LiAc法轉化酵母菌株AH109,用錶型篩選法及顏色篩選法檢測其自激活作用同時Western blot驗證誘餌蛋白的錶達.結果穫得NP編碼區基因,併成功構建酵母雙雜交繫統中的誘餌載體pGBKT7-NP,對宿主細胞酵母菌株AH109無毒性和自激活作用,併能在酵母細胞中穩定錶達.結論誘餌載體pGBKT7-NP可用于GAL4酵母雙雜交繫統釣取與禽流感病毒覈蛋白相互作用的蛋白.
목적 구건H5N1아형금류감병독NP기인적효모쌍잡교유이재체,험증기재효모중적표체병검측기자격활작용.방법이PCR법종pGEMT/H5NP확증NP기인편마구서렬,장기정향극륭도PGBKT7재체,경측서감정후,PEG/LiAc법전화효모균주AH109,용표형사선법급안색사선법검측기자격활작용동시Western blot험증유이단백적표체.결과획득NP편마구기인,병성공구건효모쌍잡교계통중적유이재체pGBKT7-NP,대숙주세포효모균주AH109무독성화자격활작용,병능재효모세포중은정표체.결론유이재체pGBKT7-NP가용우GAL4효모쌍잡교계통조취여금류감병독핵단백상호작용적단백.
