CAJ | 학술논문

目的:探讨关节软骨细胞凋亡、基质金属蛋白酶组织抑制因子1、神经元型一氧化氮合酶在骨性关节炎发病机制中的作用.方法:实验于2004-06/2005-05在兰州大学第一医院中心实验室完成.将健康幼年(兔龄2～4个月)雄性青紫蓝家兔36只,随机分成正常组(不作任何处理)、模型组各18只.模型组右后下肢膝关节伸直位石膏管型固定.运用流式细胞分析法测定凋亡的软骨细胞.采用免疫组织化学法分别于造模后6,8周两个时期进行基质金属蛋白酶组织抑制因子1、神经元型一氧化氮合酶阳性强度观察.结果:纳入动物36只,均进入结果分析.①6～8周软骨细胞凋亡测定:8周时正常组软骨细胞凋亡与模型组比率比较差异显著[正常组、模型组分别为(5.666 7±3.541 2)%,(2.377 8±1.337 7)%,p=-0.019],其他各时间段、各组均数和比率比较差异均无显著性.②6～8周时神经元型一氧化氮合酶:6周时各组间比较差异均无显著性(P＞0.05);8周时损伤胶原化区与各组间比较差异均显著(P=0.034),其他组间比较均无显著性(P＞0.05).③6～8周时基质金属蛋白酶组织抑制因子1:6周时各组间比较差异显著(P=0.009);除正常组与损伤胶原化区、增殖肥厚区与无损伤区比较差异无显著性(P＞0.05),其余各组间比较差异均显著(P＜0.05);8周时各组间比较差异显著(P=0.001);正常组与损伤胶原化区、增殖肥厚区、无损伤区及损伤胶原化区与增殖肥厚区、无损伤区比较差异显著(P＜0.05),增殖肥厚区与无损伤区比较差异无显著性(P＞0.05);经非参数秩和检验正常组6～8周间基质金属蛋白酶组织抑制因子1比较差异显著(P＜0.000 1);模型组6～8周间基质金属蛋白酶组织抑制因子1比较差异均无显著性(P＞0.05).③秩(spearm等级)相关性分析:6～8周时正常组各指标无相关性(P＞0.05);6周时基质金属蛋白酶组织抑制因子1损伤胶原化区和增殖肥厚区与软骨细胞凋亡各指标间有相关性(P=0.03,P＜0.000 1);6周时无损伤区各指标间均无相关性(P＞0.05);8周时损伤胶原化区和无损伤区各指标间无相关性(P＞0.05).结论:创伤6周后基质金属蛋白酶组织抑制因子1强度表达,软骨出现明显创伤性增殖肥厚、胶原化损伤并与同期软骨细胞凋亡的表达呈正相关,随时间延长这种相关性变化趋势不明显.6周时基质金属蛋白酶组织抑制因子1在软骨损伤胶原化区、增殖肥厚区、无损伤区表达均增强,尤以损伤胶原化区较明显,在增殖肥厚区与无损伤区表达强度相当.创伤8周后软骨增殖肥厚、胶原化损伤的破坏进行性加重,与此同时神经元型一氧化氮合酶、基质金属蛋白酶组织抑制因子1强烈表达,软骨细胞凋亡现象显著,且其表达与基质金属蛋白酶组织抑制因子1呈正相关,同期正常情况下软骨细胞凋亡几乎无表达.故Hulth法动物模型应当是目前研究骨关节炎的最佳模型;"软骨细胞凋亡"是独立导致骨关节炎发病的一条主要途径;骨关节炎病理机制中存在破坏的多分子轴心系统. 目的:探討關節軟骨細胞凋亡、基質金屬蛋白酶組織抑製因子1、神經元型一氧化氮閤酶在骨性關節炎髮病機製中的作用.方法:實驗于2004-06/2005-05在蘭州大學第一醫院中心實驗室完成.將健康幼年(兔齡2～4箇月)雄性青紫藍傢兔36隻,隨機分成正常組(不作任何處理)、模型組各18隻.模型組右後下肢膝關節伸直位石膏管型固定.運用流式細胞分析法測定凋亡的軟骨細胞.採用免疫組織化學法分彆于造模後6,8週兩箇時期進行基質金屬蛋白酶組織抑製因子1、神經元型一氧化氮閤酶暘性彊度觀察.結果:納入動物36隻,均進入結果分析.①6～8週軟骨細胞凋亡測定:8週時正常組軟骨細胞凋亡與模型組比率比較差異顯著[正常組、模型組分彆為(5.666 7±3.541 2)%,(2.377 8±1.337 7)%,p=-0.019],其他各時間段、各組均數和比率比較差異均無顯著性.②6～8週時神經元型一氧化氮閤酶:6週時各組間比較差異均無顯著性(P＞0.05);8週時損傷膠原化區與各組間比較差異均顯著(P=0.034),其他組間比較均無顯著性(P＞0.05).③6～8週時基質金屬蛋白酶組織抑製因子1:6週時各組間比較差異顯著(P=0.009);除正常組與損傷膠原化區、增殖肥厚區與無損傷區比較差異無顯著性(P＞0.05),其餘各組間比較差異均顯著(P＜0.05);8週時各組間比較差異顯著(P=0.001);正常組與損傷膠原化區、增殖肥厚區、無損傷區及損傷膠原化區與增殖肥厚區、無損傷區比較差異顯著(P＜0.05),增殖肥厚區與無損傷區比較差異無顯著性(P＞0.05);經非參數秩和檢驗正常組6～8週間基質金屬蛋白酶組織抑製因子1比較差異顯著(P＜0.000 1);模型組6～8週間基質金屬蛋白酶組織抑製因子1比較差異均無顯著性(P＞0.05).③秩(spearm等級)相關性分析:6～8週時正常組各指標無相關性(P＞0.05);6週時基質金屬蛋白酶組織抑製因子1損傷膠原化區和增殖肥厚區與軟骨細胞凋亡各指標間有相關性(P=0.03,P＜0.000 1);6週時無損傷區各指標間均無相關性(P＞0.05);8週時損傷膠原化區和無損傷區各指標間無相關性(P＞0.05).結論:創傷6週後基質金屬蛋白酶組織抑製因子1彊度錶達,軟骨齣現明顯創傷性增殖肥厚、膠原化損傷併與同期軟骨細胞凋亡的錶達呈正相關,隨時間延長這種相關性變化趨勢不明顯.6週時基質金屬蛋白酶組織抑製因子1在軟骨損傷膠原化區、增殖肥厚區、無損傷區錶達均增彊,尤以損傷膠原化區較明顯,在增殖肥厚區與無損傷區錶達彊度相噹.創傷8週後軟骨增殖肥厚、膠原化損傷的破壞進行性加重,與此同時神經元型一氧化氮閤酶、基質金屬蛋白酶組織抑製因子1彊烈錶達,軟骨細胞凋亡現象顯著,且其錶達與基質金屬蛋白酶組織抑製因子1呈正相關,同期正常情況下軟骨細胞凋亡幾乎無錶達.故Hulth法動物模型應噹是目前研究骨關節炎的最佳模型;"軟骨細胞凋亡"是獨立導緻骨關節炎髮病的一條主要途徑;骨關節炎病理機製中存在破壞的多分子軸心繫統.
목적:탐토관절연골세포조망、기질금속단백매조직억제인자1、신경원형일양화담합매재골성관절염발병궤제중적작용.방법:실험우2004-06/2005-05재란주대학제일의원중심실험실완성.장건강유년(토령2～4개월)웅성청자람가토36지,수궤분성정상조(불작임하처리)、모형조각18지.모형조우후하지슬관절신직위석고관형고정.운용류식세포분석법측정조망적연골세포.채용면역조직화학법분별우조모후6,8주량개시기진행기질금속단백매조직억제인자1、신경원형일양화담합매양성강도관찰.결과:납입동물36지,균진입결과분석.①6～8주연골세포조망측정:8주시정상조연골세포조망여모형조비솔비교차이현저[정상조、모형조분별위(5.666 7±3.541 2)%,(2.377 8±1.337 7)%,p=-0.019],기타각시간단、각조균수화비솔비교차이균무현저성.②6～8주시신경원형일양화담합매:6주시각조간비교차이균무현저성(P＞0.05);8주시손상효원화구여각조간비교차이균현저(P=0.034),기타조간비교균무현저성(P＞0.05).③6～8주시기질금속단백매조직억제인자1:6주시각조간비교차이현저(P=0.009);제정상조여손상효원화구、증식비후구여무손상구비교차이무현저성(P＞0.05),기여각조간비교차이균현저(P＜0.05);8주시각조간비교차이현저(P=0.001);정상조여손상효원화구、증식비후구、무손상구급손상효원화구여증식비후구、무손상구비교차이현저(P＜0.05),증식비후구여무손상구비교차이무현저성(P＞0.05);경비삼수질화검험정상조6～8주간기질금속단백매조직억제인자1비교차이현저(P＜0.000 1);모형조6～8주간기질금속단백매조직억제인자1비교차이균무현저성(P＞0.05).③질(spearm등급)상관성분석:6～8주시정상조각지표무상관성(P＞0.05);6주시기질금속단백매조직억제인자1손상효원화구화증식비후구여연골세포조망각지표간유상관성(P=0.03,P＜0.000 1);6주시무손상구각지표간균무상관성(P＞0.05);8주시손상효원화구화무손상구각지표간무상관성(P＞0.05).결론:창상6주후기질금속단백매조직억제인자1강도표체,연골출현명현창상성증식비후、효원화손상병여동기연골세포조망적표체정정상관,수시간연장저충상관성변화추세불명현.6주시기질금속단백매조직억제인자1재연골손상효원화구、증식비후구、무손상구표체균증강,우이손상효원화구교명현,재증식비후구여무손상구표체강도상당.창상8주후연골증식비후、효원화손상적파배진행성가중,여차동시신경원형일양화담합매、기질금속단백매조직억제인자1강렬표체,연골세포조망현상현저,차기표체여기질금속단백매조직억제인자1정정상관,동기정상정황하연골세포조망궤호무표체.고Hulth법동물모형응당시목전연구골관절염적최가모형;"연골세포조망"시독립도치골관절염발병적일조주요도경;골관절염병리궤제중존재파배적다분자축심계통.