畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2006年
12期
17-20
,共4页
扩增%POU功能域%原核表达
擴增%POU功能域%原覈錶達
확증%POU공능역%원핵표체
根据GenBank已发表的鸡Oct-1基因序列(M29972)设计一对引物,利用RT-PCR技术从SPF鸡肝脏中扩增出编码Oct-1 POU功能域的cDNA序列,序列比较表明,与GenBank中发表的鸡Oct-1基因的同源性为99.6%,推导的氨基酸的同源性为99%.构建了原核表达载体pET-POU,利用IPTG在大肠杆菌中诱导表达,并对表达产物进行了纯化,结果表明,Oct-1 POU功能域在大肠杆菌中获得高效可溶性表达,融合蛋白的分子量约为37kD,表达产物经His·Bind亲和层析得到纯化的蛋白.
根據GenBank已髮錶的鷄Oct-1基因序列(M29972)設計一對引物,利用RT-PCR技術從SPF鷄肝髒中擴增齣編碼Oct-1 POU功能域的cDNA序列,序列比較錶明,與GenBank中髮錶的鷄Oct-1基因的同源性為99.6%,推導的氨基痠的同源性為99%.構建瞭原覈錶達載體pET-POU,利用IPTG在大腸桿菌中誘導錶達,併對錶達產物進行瞭純化,結果錶明,Oct-1 POU功能域在大腸桿菌中穫得高效可溶性錶達,融閤蛋白的分子量約為37kD,錶達產物經His·Bind親和層析得到純化的蛋白.
근거GenBank이발표적계Oct-1기인서렬(M29972)설계일대인물,이용RT-PCR기술종SPF계간장중확증출편마Oct-1 POU공능역적cDNA서렬,서렬비교표명,여GenBank중발표적계Oct-1기인적동원성위99.6%,추도적안기산적동원성위99%.구건료원핵표체재체pET-POU,이용IPTG재대장간균중유도표체,병대표체산물진행료순화,결과표명,Oct-1 POU공능역재대장간균중획득고효가용성표체,융합단백적분자량약위37kD,표체산물경His·Bind친화층석득도순화적단백.
