河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2006年
3期
38-42,62
,共6页
余云芳%姚伟%李红梅%段真珍%何正权%乐超银%张昌菊%梁宏伟
餘雲芳%姚偉%李紅梅%段真珍%何正權%樂超銀%張昌菊%樑宏偉
여운방%요위%리홍매%단진진%하정권%악초은%장창국%량굉위
花生%组织培养%农杆菌介导法%GUS检测
花生%組織培養%農桿菌介導法%GUS檢測
화생%조직배양%농간균개도법%GUS검측
以黑花生品种黑霸920成熟种胚、幼叶和胚轴为外植体,对黑花生植株再生和遗传转化进行了研究.通过设置一系列不同浓度激素配比的培养基来优化各阶段培养条件,初步建立了高效的黑花生再生体系,即花生种子经75%乙醇表面消毒15 min,MS+6-BA 2.0 mg/L为最优化的种子萌发培养基,MS+2,4-D 2.0 mg/L为最佳诱导愈伤培养基,幼叶为最佳诱导愈伤组织的外植体,MS+6-BA 8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AgNO31 mg/L为最佳分化培养基,MS+NAA 2.0mg/L+6-BA 0.2 mg/L+活性炭200 mg/L为最佳生根培养基.同时确定了愈伤组织和幼苗的卡那霉素筛选压分别为30 mg/L和300 mg/L.利用农杆菌介导法将含有GUS基因和NPTⅡ基因的植物表达载体pBI121导入花生组织,在对愈伤组织、幼叶和胚轴的GUS表达检测中均有蓝色斑块出现,证明GUS基因已成功转入到花生细胞中.
以黑花生品種黑霸920成熟種胚、幼葉和胚軸為外植體,對黑花生植株再生和遺傳轉化進行瞭研究.通過設置一繫列不同濃度激素配比的培養基來優化各階段培養條件,初步建立瞭高效的黑花生再生體繫,即花生種子經75%乙醇錶麵消毒15 min,MS+6-BA 2.0 mg/L為最優化的種子萌髮培養基,MS+2,4-D 2.0 mg/L為最佳誘導愈傷培養基,幼葉為最佳誘導愈傷組織的外植體,MS+6-BA 8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AgNO31 mg/L為最佳分化培養基,MS+NAA 2.0mg/L+6-BA 0.2 mg/L+活性炭200 mg/L為最佳生根培養基.同時確定瞭愈傷組織和幼苗的卡那黴素篩選壓分彆為30 mg/L和300 mg/L.利用農桿菌介導法將含有GUS基因和NPTⅡ基因的植物錶達載體pBI121導入花生組織,在對愈傷組織、幼葉和胚軸的GUS錶達檢測中均有藍色斑塊齣現,證明GUS基因已成功轉入到花生細胞中.
이흑화생품충흑패920성숙충배、유협화배축위외식체,대흑화생식주재생화유전전화진행료연구.통과설치일계렬불동농도격소배비적배양기래우화각계단배양조건,초보건립료고효적흑화생재생체계,즉화생충자경75%을순표면소독15 min,MS+6-BA 2.0 mg/L위최우화적충자맹발배양기,MS+2,4-D 2.0 mg/L위최가유도유상배양기,유협위최가유도유상조직적외식체,MS+6-BA 8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AgNO31 mg/L위최가분화배양기,MS+NAA 2.0mg/L+6-BA 0.2 mg/L+활성탄200 mg/L위최가생근배양기.동시학정료유상조직화유묘적잡나매소사선압분별위30 mg/L화300 mg/L.이용농간균개도법장함유GUS기인화NPTⅡ기인적식물표체재체pBI121도입화생조직,재대유상조직、유협화배축적GUS표체검측중균유람색반괴출현,증명GUS기인이성공전입도화생세포중.
