SARS-CoV刺突蛋白受体结合区的表达及高潜在中和性人源抗体的制备
SARS-CoV자돌단백수체결합구적표체급고잠재중화성인원항체적제비
Expression of Receptor-binding Domain of SARS-CoV Spike Protein and Isolation of Highly Potent Neutralizing Antibody
  • 万方数据
    科学技术与工程 과학기술여공정
    SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
    2005年 14期 939-943 ,共5页

    李郁%姚西英%杨勇%陈江浩%张思河%宋斐%包国强%杨向民%陈志南

    리욱%요서영%양용%진강호%장사하%송비%포국강%양향민%진지남

    严重急性呼吸综合征(SARS)%刺突蛋白%RBD%噬菌体抗体%Fab 嚴重急性呼吸綜閤徵(SARS)%刺突蛋白%RBD%噬菌體抗體%Fab
    엄중급성호흡종합정(SARS)%자돌단백%RBD%서균체항체%Fab
    为表达SARS-CoV刺突蛋白S(Spike)受体结合区(RBD)并从中筛选高潜在中和性人源抗体,我们用原核表达并纯化的SARS-CoV S RBD进行抗体库的筛选.从多个曾患SARS的健康人血中获得淋巴细胞,PCR扩增全部抗体基因,插入Pcomb3x载体中,构建抗SARS病毒人源噬菌体抗体库.利用噬菌体表面呈现技术,从中筛选结合SARS-CoV S RBD的人源抗体并用ELISA及Western blot鉴定阳性克隆,竞争ELISA检测人源抗体阻断SARS-CoV S RBD与其受体ACE2的结合情况.结果为构建了库容量6.2×107的免疫Fab噬菌体抗体库,重组率为75%,从中筛选获得9株特异抗SARS-CoV S RBD的人源Fab抗体,ELiSA及Western blot检测均为阳性.其中有一株能阻断SARS-CoV S RBD与其受体ACE2的结合.本实验结果表明:人源抗SARS-CoV S RBD基因工程抗体的获得,一方面将对SARS疾病的特异性预防,治疗和诊断提供新的途径,同时也提示SARS-CoV亚单位疫苗可以用于SARS疾病的预防.
    위표체SARS-CoV자돌단백S(Spike)수체결합구(RBD)병종중사선고잠재중화성인원항체,아문용원핵표체병순화적SARS-CoV S RBD진행항체고적사선.종다개증환SARS적건강인혈중획득림파세포,PCR확증전부항체기인,삽입Pcomb3x재체중,구건항SARS병독인원서균체항체고.이용서균체표면정현기술,종중사선결합SARS-CoV S RBD적인원항체병용ELISA급Western blot감정양성극륭,경쟁ELISA검측인원항체조단SARS-CoV S RBD여기수체ACE2적결합정황.결과위구건료고용량6.2×107적면역Fab서균체항체고,중조솔위75%,종중사선획득9주특이항SARS-CoV S RBD적인원Fab항체,ELiSA급Western blot검측균위양성.기중유일주능조단SARS-CoV S RBD여기수체ACE2적결합.본실험결과표명:인원항SARS-CoV S RBD기인공정항체적획득,일방면장대SARS질병적특이성예방,치료화진단제공신적도경,동시야제시SARS-CoV아단위역묘가이용우SARS질병적예방.
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