CAJ | 학술논문

分别测定谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)AS1.495及其3个逐个叠加不同遗传标记的突变株AA361、AAT231和AATV341在特定培养时段(26～28h)L-缬氨酸等代谢物的胞外浓度,由此计算这一时段这些代谢物在发酵液中积累(或消耗)的速率,分别做出这4株菌在拟稳态下的代谢流量分布图,进而研究育种过程中不同遗传标记的叠加对代谢网络中L-缬氨酸合成流量分布的影响.结果表明遗传标记的引入使流量分配发生了重大变化,节点处的流量分配朝着有利于L-缬氨酸合成的方向改变.6-磷酸葡萄糖节点处流入EMP途径和HMP途径的流量分配由17.0:83.0变为24.3:75.7;丙酮酸节点处流入L-缬氨酸合成途径和其他途径的流量分配由15.8:84.2变为76.7:23.3.L-缬氨酸合成的分支途径上的流量由最初的5.37增大为37.3,乳酸合成途径的流量从11.1最后降为1.16,L-缬氨酸产量由4 g/L提高到24.5 g/L.代谢流量分布的变化趋势与L-缬氨酸产量的变化趋势是互相吻合的.以2-噻唑丙氨酸抗性突变(2-TAr)和L-天冬氨酸氧肟酸盐超敏性突变(L-AAHss)有效地进行代谢流遗传导向的事实,在代谢流量分析的层面上,证明结构类似物抗性突变和结构类似物超敏性突变是代谢流导向和设计育种的十分有效的手段,代谢流量分析会成为设计育种的校正方法.
분별측정곡안산봉간균(Corynebacterium glutamicum)AS1.495급기3개축개첩가불동유전표기적돌변주AA361、AAT231화AATV341재특정배양시단(26～28h)L-힐안산등대사물적포외농도,유차계산저일시단저사대사물재발효액중적루(혹소모)적속솔,분별주출저4주균재의은태하적대사류량분포도,진이연구육충과정중불동유전표기적첩가대대사망락중L-힐안산합성류량분포적영향.결과표명유전표기적인입사류량분배발생료중대변화,절점처적류량분배조착유리우L-힐안산합성적방향개변.6-린산포도당절점처류입EMP도경화HMP도경적류량분배유17.0:83.0변위24.3:75.7;병동산절점처류입L-힐안산합성도경화기타도경적류량분배유15.8:84.2변위76.7:23.3.L-힐안산합성적분지도경상적류량유최초적5.37증대위37.3,유산합성도경적류량종11.1최후강위1.16,L-힐안산산량유4 g/L제고도24.5 g/L.대사류량분포적변화추세여L-힐안산산량적변화추세시호상문합적.이2-새서병안산항성돌변(2-TAr)화L-천동안산양우산염초민성돌변(L-AAHss)유효지진행대사류유전도향적사실,재대사류량분석적층면상,증명결구유사물항성돌변화결구유사물초민성돌변시대사류도향화설계육충적십분유효적수단,대사류량분석회성위설계육충적교정방법.