中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2003年
7期
768-771
,共4页
田辉凯%姚小皓%马兵%张红梅%李学军
田輝凱%姚小皓%馬兵%張紅梅%李學軍
전휘개%요소호%마병%장홍매%리학군
非细胞翻译体系%细胞凋亡%TFAR19%非洲爪蟾卵母细胞
非細胞翻譯體繫%細胞凋亡%TFAR19%非洲爪蟾卵母細胞
비세포번역체계%세포조망%TFAR19%비주조섬란모세포
目的当前人类基因组研究的重心正在由"结构"向"功能"转移.而基因功能的研究离不开基因的表达,这就迫切需要一种操作简便,适用范围广的表达工具来表达有功能的蛋白质.方法非洲爪蟾注射HCG催卵,2%半胱氨酸去胶膜,高速离心制备卵提取物,即为非洲爪蟾卵非细胞翻译体系.通过亚克隆技术将TFAR19基因克隆到体外转录质粒中,通过酶切线性化模板,体外转录,加帽合成cRNA,将其加入到制备的蛙卵提取物中进行体外翻译.结果用Western blot鉴定,获得了高效翻译,并且加入亚精胺和ATP再生系统可以提高翻译的效率.结论非洲爪蟾卵非细胞翻译体系为表达有功能的蛋白提供了一种极有应用前景的表达工具.
目的噹前人類基因組研究的重心正在由"結構"嚮"功能"轉移.而基因功能的研究離不開基因的錶達,這就迫切需要一種操作簡便,適用範圍廣的錶達工具來錶達有功能的蛋白質.方法非洲爪蟾註射HCG催卵,2%半胱氨痠去膠膜,高速離心製備卵提取物,即為非洲爪蟾卵非細胞翻譯體繫.通過亞剋隆技術將TFAR19基因剋隆到體外轉錄質粒中,通過酶切線性化模闆,體外轉錄,加帽閤成cRNA,將其加入到製備的蛙卵提取物中進行體外翻譯.結果用Western blot鑒定,穫得瞭高效翻譯,併且加入亞精胺和ATP再生繫統可以提高翻譯的效率.結論非洲爪蟾卵非細胞翻譯體繫為錶達有功能的蛋白提供瞭一種極有應用前景的錶達工具.
목적당전인류기인조연구적중심정재유"결구"향"공능"전이.이기인공능적연구리불개기인적표체,저취박절수요일충조작간편,괄용범위엄적표체공구래표체유공능적단백질.방법비주조섬주사HCG최란,2%반광안산거효막,고속리심제비란제취물,즉위비주조섬란비세포번역체계.통과아극륭기술장TFAR19기인극륭도체외전록질립중,통과매절선성화모판,체외전록,가모합성cRNA,장기가입도제비적와란제취물중진행체외번역.결과용Western blot감정,획득료고효번역,병차가입아정알화ATP재생계통가이제고번역적효솔.결론비주조섬란비세포번역체계위표체유공능적단백제공료일충겁유응용전경적표체공구.
