第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2003年
3期
206-209
,共4页
郭爱华%龚小卫%阚文宏%秦清和%邓鹏%王静珍%姜勇
郭愛華%龔小衛%闞文宏%秦清和%鄧鵬%王靜珍%薑勇
곽애화%공소위%감문굉%진청화%산붕%왕정진%강용
一氧化氮合酶%p38丝裂原激活蛋白激酶%基因表达调控,酶学%转录,遗传%共转染
一氧化氮閤酶%p38絲裂原激活蛋白激酶%基因錶達調控,酶學%轉錄,遺傳%共轉染
일양화담합매%p38사렬원격활단백격매%기인표체조공,매학%전록,유전%공전염
目的探讨p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)家族四种亚型对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的转录调控.方法以人胚胎肾293(HEK 293)细胞为靶细胞,采用脂质体(LPS)介导的细胞基因共转染技术、荧光素酶报告基因技术,分别将FLAG-tagged p38 MAPK4种亚型、含有鼠iNOS基因启动子区的荧光素酶报告基因质粒(piNOS-Luc)、空载体(pcDNA3)、β-半乳糖苷酶表达质粒(pCMV-β)共转染,检测并比较荧光素酶相对活性.结果 (1)未加刺激时,在HEK293细胞中,p38 MAPK中仅有p38α能够诱导iNOS基因启动子的转录活性;(2)在LPS刺激下,p38 MAPK 4种亚型均能够诱导iNOS启动子的转录活性,其中,p38β所诱导的转录活性最高,p38α的诱导作用亦很明显.结论 (1)LPS能够在HEK 293细胞中诱导iNOS基因转录活性;(2)在HEK 293细胞中,p38 MAPK参与了静息时及LPS刺激下对iNOS基因的转录调控.
目的探討p38絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)傢族四種亞型對誘導型一氧化氮閤酶(iNOS)基因的轉錄調控.方法以人胚胎腎293(HEK 293)細胞為靶細胞,採用脂質體(LPS)介導的細胞基因共轉染技術、熒光素酶報告基因技術,分彆將FLAG-tagged p38 MAPK4種亞型、含有鼠iNOS基因啟動子區的熒光素酶報告基因質粒(piNOS-Luc)、空載體(pcDNA3)、β-半乳糖苷酶錶達質粒(pCMV-β)共轉染,檢測併比較熒光素酶相對活性.結果 (1)未加刺激時,在HEK293細胞中,p38 MAPK中僅有p38α能夠誘導iNOS基因啟動子的轉錄活性;(2)在LPS刺激下,p38 MAPK 4種亞型均能夠誘導iNOS啟動子的轉錄活性,其中,p38β所誘導的轉錄活性最高,p38α的誘導作用亦很明顯.結論 (1)LPS能夠在HEK 293細胞中誘導iNOS基因轉錄活性;(2)在HEK 293細胞中,p38 MAPK參與瞭靜息時及LPS刺激下對iNOS基因的轉錄調控.
목적탐토p38사렬원격활단백격매(MAPK)가족사충아형대유도형일양화담합매(iNOS)기인적전록조공.방법이인배태신293(HEK 293)세포위파세포,채용지질체(LPS)개도적세포기인공전염기술、형광소매보고기인기술,분별장FLAG-tagged p38 MAPK4충아형、함유서iNOS기인계동자구적형광소매보고기인질립(piNOS-Luc)、공재체(pcDNA3)、β-반유당감매표체질립(pCMV-β)공전염,검측병비교형광소매상대활성.결과 (1)미가자격시,재HEK293세포중,p38 MAPK중부유p38α능구유도iNOS기인계동자적전록활성;(2)재LPS자격하,p38 MAPK 4충아형균능구유도iNOS계동자적전록활성,기중,p38β소유도적전록활성최고,p38α적유도작용역흔명현.결론 (1)LPS능구재HEK 293세포중유도iNOS기인전록활성;(2)재HEK 293세포중,p38 MAPK삼여료정식시급LPS자격하대iNOS기인적전록조공.
