中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2003年
3期
202-214
,共13页
罗敏%米志勇%曲红%唐朝荣%梁卫红%吴乃虎
囉敏%米誌勇%麯紅%唐朝榮%樑衛紅%吳迺虎
라민%미지용%곡홍%당조영%량위홍%오내호
水稻%Rac家族%基因克隆%osRACB
水稻%Rac傢族%基因剋隆%osRACB
수도%Rac가족%기인극륭%osRACB
Rac基因是植物中惟一的一类分布广泛的信号GTP结合蛋白, 它在整个植物生长发育过程中起着极为重要的作用. 应用本实验室已有的水稻光周期育性转换相关基因osRACD为探针, 在低严谨杂交条件下, 筛选农垦58N-LD雌雄蕊形成期(第Ⅳ期)幼穗cDNA文库, 获得一水稻Rac家族新基因. 经同源性比较和序列分析显示, 该基因与玉米Rac家族成员RACB基因具有93%的核苷酸同源性, 且两者氨基酸序列长度相等, 仅存在一个氨基酸残基差异, 故命名新基因为osRACB. 进一步应用PCR技术, 以农垦58N基因组DNA为模板扩增得到长度为2930 bp的osRACB基因转录区核苷酸序列, 其结构包含7个外显子和6个内含子, 同时, 通过基因组文库筛选获得osRACB基因的启动区序列. Southern杂交分析表明osRACB基因同其他Rac基因相似, 是低拷贝基因. RT-PCR检测显示osRACB基因在水稻根、茎、叶中均有一定的表达, 但在茎中表达量最高. 此外, 还以人Rac1蛋白为模板, 利用InsightII软件包下的Homology, Discover等模块对osRACB蛋白进行了三级结构预测.
Rac基因是植物中惟一的一類分佈廣汎的信號GTP結閤蛋白, 它在整箇植物生長髮育過程中起著極為重要的作用. 應用本實驗室已有的水稻光週期育性轉換相關基因osRACD為探針, 在低嚴謹雜交條件下, 篩選農墾58N-LD雌雄蕊形成期(第Ⅳ期)幼穗cDNA文庫, 穫得一水稻Rac傢族新基因. 經同源性比較和序列分析顯示, 該基因與玉米Rac傢族成員RACB基因具有93%的覈苷痠同源性, 且兩者氨基痠序列長度相等, 僅存在一箇氨基痠殘基差異, 故命名新基因為osRACB. 進一步應用PCR技術, 以農墾58N基因組DNA為模闆擴增得到長度為2930 bp的osRACB基因轉錄區覈苷痠序列, 其結構包含7箇外顯子和6箇內含子, 同時, 通過基因組文庫篩選穫得osRACB基因的啟動區序列. Southern雜交分析錶明osRACB基因同其他Rac基因相似, 是低拷貝基因. RT-PCR檢測顯示osRACB基因在水稻根、莖、葉中均有一定的錶達, 但在莖中錶達量最高. 此外, 還以人Rac1蛋白為模闆, 利用InsightII軟件包下的Homology, Discover等模塊對osRACB蛋白進行瞭三級結構預測.
Rac기인시식물중유일적일류분포엄범적신호GTP결합단백, 타재정개식물생장발육과정중기착겁위중요적작용. 응용본실험실이유적수도광주기육성전환상관기인osRACD위탐침, 재저엄근잡교조건하, 사선농은58N-LD자웅예형성기(제Ⅳ기)유수cDNA문고, 획득일수도Rac가족신기인. 경동원성비교화서렬분석현시, 해기인여옥미Rac가족성원RACB기인구유93%적핵감산동원성, 차량자안기산서렬장도상등, 부존재일개안기산잔기차이, 고명명신기인위osRACB. 진일보응용PCR기술, 이농은58N기인조DNA위모판확증득도장도위2930 bp적osRACB기인전록구핵감산서렬, 기결구포함7개외현자화6개내함자, 동시, 통과기인조문고사선획득osRACB기인적계동구서렬. Southern잡교분석표명osRACB기인동기타Rac기인상사, 시저고패기인. RT-PCR검측현시osRACB기인재수도근、경、협중균유일정적표체, 단재경중표체량최고. 차외, 환이인Rac1단백위모판, 이용InsightII연건포하적Homology, Discover등모괴대osRACB단백진행료삼급결구예측.
