科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
1999年
12期
1266-1271
,共6页
高粱%psbA基因%5'-非编码区%定点突变%表达调控
高粱%psbA基因%5'-非編碼區%定點突變%錶達調控
고량%psbA기인%5'-비편마구%정점돌변%표체조공
应用化学合成的20 nt寡核苷酸引物,诱导高粱psbA基因启动子"-35"元件(TTGACA)中的第1位T碱基和第3位G碱基发生突变,获得3个突变体ATTACA,GTGACA和ATGACA. 在菠菜叶绿体蛋白质提取物系统中,检测突变的及野生型的高粱psbA基因启动子与蛋白质的结合能力. 凝胶阻滞实验结果表明,野生型的具有很强的蛋白质结合条带,单碱基突变体ATGACA和GTGACA的蛋白质条带的强度明显下降,而双碱基突变体ATTACA的蛋白质结合条带的强度反而比野生型增强. 由此可见"-35"元件在调控psbA基因启动子与叶绿体特异蛋白质的结合反应中,具有重要的作用,其中个别碱基的突变便会显著地影响启动子与蛋白质的结合能力.
應用化學閤成的20 nt寡覈苷痠引物,誘導高粱psbA基因啟動子"-35"元件(TTGACA)中的第1位T堿基和第3位G堿基髮生突變,穫得3箇突變體ATTACA,GTGACA和ATGACA. 在菠菜葉綠體蛋白質提取物繫統中,檢測突變的及野生型的高粱psbA基因啟動子與蛋白質的結閤能力. 凝膠阻滯實驗結果錶明,野生型的具有很彊的蛋白質結閤條帶,單堿基突變體ATGACA和GTGACA的蛋白質條帶的彊度明顯下降,而雙堿基突變體ATTACA的蛋白質結閤條帶的彊度反而比野生型增彊. 由此可見"-35"元件在調控psbA基因啟動子與葉綠體特異蛋白質的結閤反應中,具有重要的作用,其中箇彆堿基的突變便會顯著地影響啟動子與蛋白質的結閤能力.
응용화학합성적20 nt과핵감산인물,유도고량psbA기인계동자"-35"원건(TTGACA)중적제1위T감기화제3위G감기발생돌변,획득3개돌변체ATTACA,GTGACA화ATGACA. 재파채협록체단백질제취물계통중,검측돌변적급야생형적고량psbA기인계동자여단백질적결합능력. 응효조체실험결과표명,야생형적구유흔강적단백질결합조대,단감기돌변체ATGACA화GTGACA적단백질조대적강도명현하강,이쌍감기돌변체ATTACA적단백질결합조대적강도반이비야생형증강. 유차가견"-35"원건재조공psbA기인계동자여협록체특이단백질적결합반응중,구유중요적작용,기중개별감기적돌변편회현저지영향계동자여단백질적결합능력.
