中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2003年
1期
1-4
,共4页
张东伟%梁布锋%李(日韦)东%祁自柏%凌世淦
張東偉%樑佈鋒%李(日韋)東%祁自柏%凌世淦
장동위%량포봉%리(일위)동%기자백%릉세감
HCV E2%原核系统%基因表达%纯化
HCV E2%原覈繫統%基因錶達%純化
HCV E2%원핵계통%기인표체%순화
用提取的重组表达载体pET-E2转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,再进行SDS-PAGE,可得到有一条约34 kDa的表达带,与理论推测的蛋白分子量一致,通过Western-blot鉴定,证明此带即为目的蛋白带.该产物有一个六聚组氨酸尾,主要以包涵体形式存在;计算机扫描分析考马斯亮兰染色后的蛋白胶显示:目的蛋白占整个菌体蛋白的36%以上,经Ni-柱纯化的E2蛋白纯度可达95%以上;以纯化的E2蛋白为抗原,用ELISA方法检测了20份抗HCV阴阳性血清,结果表明15份抗HCV阳性血清中检出5份E2抗体阳性血清,而5份抗HCV阴性血清中没有检测到E2抗体.
用提取的重組錶達載體pET-E2轉化BL21(DE3)感受態細胞,經IPTG誘導,再進行SDS-PAGE,可得到有一條約34 kDa的錶達帶,與理論推測的蛋白分子量一緻,通過Western-blot鑒定,證明此帶即為目的蛋白帶.該產物有一箇六聚組氨痠尾,主要以包涵體形式存在;計算機掃描分析攷馬斯亮蘭染色後的蛋白膠顯示:目的蛋白佔整箇菌體蛋白的36%以上,經Ni-柱純化的E2蛋白純度可達95%以上;以純化的E2蛋白為抗原,用ELISA方法檢測瞭20份抗HCV陰暘性血清,結果錶明15份抗HCV暘性血清中檢齣5份E2抗體暘性血清,而5份抗HCV陰性血清中沒有檢測到E2抗體.
용제취적중조표체재체pET-E2전화BL21(DE3)감수태세포,경IPTG유도,재진행SDS-PAGE,가득도유일조약34 kDa적표체대,여이론추측적단백분자량일치,통과Western-blot감정,증명차대즉위목적단백대.해산물유일개륙취조안산미,주요이포함체형식존재;계산궤소묘분석고마사량란염색후적단백효현시:목적단백점정개균체단백적36%이상,경Ni-주순화적E2단백순도가체95%이상;이순화적E2단백위항원,용ELISA방법검측료20빈항HCV음양성혈청,결과표명15빈항HCV양성혈청중검출5빈E2항체양성혈청,이5빈항HCV음성혈청중몰유검측도E2항체.
