CAJ | 학술논문

观察了心肌缺氧再给氧损伤的一氧化氮(nitric oxide, NO)和氧自由基机制. 新生Wistar大鼠心肌细胞置于95% N2/5% CO2环境培养24 h, 然后置于95% O2 /5% CO2环境培养4h造成缺氧再给氧心肌细胞损伤模型. 单纯缺氧组心肌细胞置于95% N2/5% CO2环境培养24 h, 但不再给氧. NO供体硝普钠(SNP, 5 μmol/L)、NO合酶抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME, 100μmol/L)和其异构体Nω-硝基-D-精氨酸甲酯(D-NAME, 100μmol/L)以及超氧化物歧化酶/过氧化氢酶(SOD/CAT, 各100 U/mL)分别于缺氧前加入培养基. 正常对照组心肌细胞置于95% 空气/5% CO2环境下培养. 结果显示, 缺氧24 h能增加培养介质中NO, 硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)和乳酸脱氢酶(LDH)水平, 再给氧降低培养介质中NO和水平, 增加TBARS和LDH水平. 缺氧上调bcl-2, p53和p21/waf1/cip1蛋白表达水平, 而再给氧下调bcl-2蛋白表达水平, 上调p53和p21/waf1/cip1蛋白表达水平. 同时, 缺氧增加心肌细胞凋亡率, 而再给氧增加心肌细胞坏死率. NO供体硝普钠(SNP)增加培养介质中和TBARS水平, 下调bcl-2蛋白表达而上调p53和p21/waf1/cip1蛋白表达水平, 增加DNA断裂、凋亡及坏死细胞率. L-NAME和 SOD/CAT分别降低培养介质中和TBARS水平, 它们均能上调bcl-2蛋白表达而下调p53和p21/waf1/cip1蛋白表达水平, 抑制DNA断裂、凋亡及坏死细胞率, 而D-NAME则无此作用. 以上结果表明, 在缺氧再给氧所致心肌细胞死亡过程中, NO和氧自由基参与下调bcl-2蛋白表达水平和上调p53和p21/waf1/cip1蛋白表达水平, 相应地激发细胞凋亡程序, 并提示一氧化氮及氧自由基诱导心肌细胞凋亡的机制与调节 bcl-2, p53和p21/waf1/cip1信号通路有关.
관찰료심기결양재급양손상적일양화담(nitric oxide, NO)화양자유기궤제. 신생Wistar대서심기세포치우95% N2/5% CO2배경배양24 h, 연후치우95% O2 /5% CO2배경배양4h조성결양재급양심기세포손상모형. 단순결양조심기세포치우95% N2/5% CO2배경배양24 h, 단불재급양. NO공체초보납(SNP, 5 μmol/L)、NO합매억제제Nω-초기-L-정안산갑지(L-NAME, 100μmol/L)화기이구체Nω-초기-D-정안산갑지(D-NAME, 100μmol/L)이급초양화물기화매/과양화경매(SOD/CAT, 각100 U/mL)분별우결양전가입배양기. 정상대조조심기세포치우95% 공기/5% CO2배경하배양. 결과현시, 결양24 h능증가배양개질중NO, 류대파비타산반응산물(TBARS)화유산탈경매(LDH)수평, 재급양강저배양개질중NO화수평, 증가TBARS화LDH수평. 결양상조bcl-2, p53화p21/waf1/cip1단백표체수평, 이재급양하조bcl-2단백표체수평, 상조p53화p21/waf1/cip1단백표체수평. 동시, 결양증가심기세포조망솔, 이재급양증가심기세포배사솔. NO공체초보납(SNP)증가배양개질중화TBARS수평, 하조bcl-2단백표체이상조p53화p21/waf1/cip1단백표체수평, 증가DNA단렬、조망급배사세포솔. L-NAME화 SOD/CAT분별강저배양개질중화TBARS수평, 타문균능상조bcl-2단백표체이하조p53화p21/waf1/cip1단백표체수평, 억제DNA단렬、조망급배사세포솔, 이D-NAME칙무차작용. 이상결과표명, 재결양재급양소치심기세포사망과정중, NO화양자유기삼여하조bcl-2단백표체수평화상조p53화p21/waf1/cip1단백표체수평, 상응지격발세포조망정서, 병제시일양화담급양자유기유도심기세포조망적궤제여조절 bcl-2, p53화p21/waf1/cip1신호통로유관.