癌症
癌癥
암증
CHINESE JOURNAL OF CANCER
2002年
3期
276-280
,共5页
杨林%叶世铎%冯伦高%王家顺%翟伟
楊林%葉世鐸%馮倫高%王傢順%翟偉
양림%협세탁%풍륜고%왕가순%적위
食管肿瘤%鳞状细胞癌%增殖细胞核抗原%反义%寡核苷酸
食管腫瘤%鱗狀細胞癌%增殖細胞覈抗原%反義%寡覈苷痠
식관종류%린상세포암%증식세포핵항원%반의%과핵감산
背景与目的:增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)在食管鳞癌患者中的高表达提示患者的预后不良.本研究拟通过基因反义封闭技术体外抑制PCNA的表达,以达到抑制肿瘤细胞恶性增殖的目的.方法:以食管鳞癌T.Tn细胞株为研究对象,采用硫代磷酸修饰的PCNA反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN),通过脂质体导入T.Tn细胞后,观察PCNAASODN对T.Tn细胞癌基因表达及体外增殖活性的影响.结果:相差显微镜下观察到T.Tn细胞转染ASODN后细胞体积变小,皱缩变形的细胞较对照组明显减少.MTT法测细胞增殖活性见不同浓度ASODN均能抑制T.Tn细胞的增殖,抑制作用在24h最强,0.2μmol/LASODN对细胞的抑制率为63.3%,时间延长抑制作用逐渐减弱.3H-TdR掺入实验表明ASODN能有效地抑制T.Tn细胞的DNA合成.免疫组化SABC法染色提示转染ASODN后T.Tn细胞mRNA的翻译受到抑制,PCNA蛋白表达水平明显降低.FCM检测发现G0-G1期细胞含量由对照组的53.65%增至72.34%,而G2-M和S期细胞则分别从15.51%、30.84%降到9.87%、17.79%.表明PCNAASODN转染导致PCNA促进细胞增殖的功能降低,抑制处于G0期的细胞进入S期.结论:使用人工合成的PCNAASODN可以特异性地抑制食管鳞癌T.Tn细胞株PCNA蛋白的表达,从而调控细胞周期,抑制细胞增殖.
揹景與目的:增殖細胞覈抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)在食管鱗癌患者中的高錶達提示患者的預後不良.本研究擬通過基因反義封閉技術體外抑製PCNA的錶達,以達到抑製腫瘤細胞噁性增殖的目的.方法:以食管鱗癌T.Tn細胞株為研究對象,採用硫代燐痠脩飾的PCNA反義寡覈苷痠(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN),通過脂質體導入T.Tn細胞後,觀察PCNAASODN對T.Tn細胞癌基因錶達及體外增殖活性的影響.結果:相差顯微鏡下觀察到T.Tn細胞轉染ASODN後細胞體積變小,皺縮變形的細胞較對照組明顯減少.MTT法測細胞增殖活性見不同濃度ASODN均能抑製T.Tn細胞的增殖,抑製作用在24h最彊,0.2μmol/LASODN對細胞的抑製率為63.3%,時間延長抑製作用逐漸減弱.3H-TdR摻入實驗錶明ASODN能有效地抑製T.Tn細胞的DNA閤成.免疫組化SABC法染色提示轉染ASODN後T.Tn細胞mRNA的翻譯受到抑製,PCNA蛋白錶達水平明顯降低.FCM檢測髮現G0-G1期細胞含量由對照組的53.65%增至72.34%,而G2-M和S期細胞則分彆從15.51%、30.84%降到9.87%、17.79%.錶明PCNAASODN轉染導緻PCNA促進細胞增殖的功能降低,抑製處于G0期的細胞進入S期.結論:使用人工閤成的PCNAASODN可以特異性地抑製食管鱗癌T.Tn細胞株PCNA蛋白的錶達,從而調控細胞週期,抑製細胞增殖.
배경여목적:증식세포핵항원(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)재식관린암환자중적고표체제시환자적예후불량.본연구의통과기인반의봉폐기술체외억제PCNA적표체,이체도억제종류세포악성증식적목적.방법:이식관린암T.Tn세포주위연구대상,채용류대린산수식적PCNA반의과핵감산(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN),통과지질체도입T.Tn세포후,관찰PCNAASODN대T.Tn세포암기인표체급체외증식활성적영향.결과:상차현미경하관찰도T.Tn세포전염ASODN후세포체적변소,추축변형적세포교대조조명현감소.MTT법측세포증식활성견불동농도ASODN균능억제T.Tn세포적증식,억제작용재24h최강,0.2μmol/LASODN대세포적억제솔위63.3%,시간연장억제작용축점감약.3H-TdR참입실험표명ASODN능유효지억제T.Tn세포적DNA합성.면역조화SABC법염색제시전염ASODN후T.Tn세포mRNA적번역수도억제,PCNA단백표체수평명현강저.FCM검측발현G0-G1기세포함량유대조조적53.65%증지72.34%,이G2-M화S기세포칙분별종15.51%、30.84%강도9.87%、17.79%.표명PCNAASODN전염도치PCNA촉진세포증식적공능강저,억제처우G0기적세포진입S기.결론:사용인공합성적PCNAASODN가이특이성지억제식관린암T.Tn세포주PCNA단백적표체,종이조공세포주기,억제세포증식.