农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2002年
2期
184-188
,共5页
曾少灵%余健秀%谢瑞瑜%蒙国基%谭乐%庞义
曾少靈%餘健秀%謝瑞瑜%矇國基%譚樂%龐義
증소령%여건수%사서유%몽국기%담악%방의
苏云金芽孢杆菌%杀虫晶体蛋白%分子伴侣基因pi9%表达载体
囌雲金芽孢桿菌%殺蟲晶體蛋白%分子伴侶基因pi9%錶達載體
소운금아포간균%살충정체단백%분자반려기인pi9%표체재체
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuriugiensis,Bt)中的分子伴侣P19蛋白能否提高杀虫晶体蛋白(insecticidal crystalproteins,ICPs)的表达量及促进晶体形成,目前尚不能确定.根据已知序列,设计了一对引物(p19-5N,p19-3N),利用这对引物从苏云金芽孢杆菌以色列亚种(B.thuringiensis subsp.israelensis)HD-567中扩增出一个1.0kb的DNA片段.序列测定及分析结果表明,这个DNA片段包含cry11Aa操纵子启动子序列、全长p19基因及其偶联的下游基因cry11Aa的ATG起始密码子.将这个片段克隆到Bt-E.coli穿梭载体pHT3101上,构建成一个含有pi9基因的Bt表达载体pHP19.其特点是在pi9基因下游的ATG处顺序插入了5个限制性酶切位点NdeI,SacI,KpnI,SacI和Eco RI,为下一步研究p19基因的功能奠定了基础.
囌雲金芽孢桿菌(Bacillus thuriugiensis,Bt)中的分子伴侶P19蛋白能否提高殺蟲晶體蛋白(insecticidal crystalproteins,ICPs)的錶達量及促進晶體形成,目前尚不能確定.根據已知序列,設計瞭一對引物(p19-5N,p19-3N),利用這對引物從囌雲金芽孢桿菌以色列亞種(B.thuringiensis subsp.israelensis)HD-567中擴增齣一箇1.0kb的DNA片段.序列測定及分析結果錶明,這箇DNA片段包含cry11Aa操縱子啟動子序列、全長p19基因及其偶聯的下遊基因cry11Aa的ATG起始密碼子.將這箇片段剋隆到Bt-E.coli穿梭載體pHT3101上,構建成一箇含有pi9基因的Bt錶達載體pHP19.其特點是在pi9基因下遊的ATG處順序插入瞭5箇限製性酶切位點NdeI,SacI,KpnI,SacI和Eco RI,為下一步研究p19基因的功能奠定瞭基礎.
소운금아포간균(Bacillus thuriugiensis,Bt)중적분자반려P19단백능부제고살충정체단백(insecticidal crystalproteins,ICPs)적표체량급촉진정체형성,목전상불능학정.근거이지서렬,설계료일대인물(p19-5N,p19-3N),이용저대인물종소운금아포간균이색렬아충(B.thuringiensis subsp.israelensis)HD-567중확증출일개1.0kb적DNA편단.서렬측정급분석결과표명,저개DNA편단포함cry11Aa조종자계동자서렬、전장p19기인급기우련적하유기인cry11Aa적ATG기시밀마자.장저개편단극륭도Bt-E.coli천사재체pHT3101상,구건성일개함유pi9기인적Bt표체재체pHP19.기특점시재pi9기인하유적ATG처순서삽입료5개한제성매절위점NdeI,SacI,KpnI,SacI화Eco RI,위하일보연구p19기인적공능전정료기출.
