农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2008年
1期
37-40
,共4页
任红艳%张兴举%杨述林%崔文涛%唐中林%李奎
任紅豔%張興舉%楊述林%崔文濤%唐中林%李奎
임홍염%장흥거%양술림%최문도%당중림%리규
人角蛋白K14%转基因小鼠%c-Myc基因%皮肤特异表达
人角蛋白K14%轉基因小鼠%c-Myc基因%皮膚特異錶達
인각단백K14%전기인소서%c-Myc기인%피부특이표체
以CMV-PAAV载体为基础载体,以皮肤特异人K14(人角蛋白14)基因启动子替换原质粒中的CMV启动子后,在其多克隆位点区插入鼠c-Myc基因的cDNA序列和GFP编码序列,构建成高效表达c-Myc基因的真核表达载体.通过双原核显微注射技术,将线性化的载体DNA注入到C57BL6近交系小鼠(Mus musculus)受精卵的2个原核中,将注射后状态良好的胚胎移植到代孕鼠的输卵管中,共移植了200枚受精卵,6只受体怀孕,最终获得44只成年小鼠.通过PCR和Southern blot分析证明,2只为阳性转基因小鼠,转基因阳性率为4%.Southern blot结果分析显示,外源片段是以多拷贝串联重复的形式整合到鼠染色体中.
以CMV-PAAV載體為基礎載體,以皮膚特異人K14(人角蛋白14)基因啟動子替換原質粒中的CMV啟動子後,在其多剋隆位點區插入鼠c-Myc基因的cDNA序列和GFP編碼序列,構建成高效錶達c-Myc基因的真覈錶達載體.通過雙原覈顯微註射技術,將線性化的載體DNA註入到C57BL6近交繫小鼠(Mus musculus)受精卵的2箇原覈中,將註射後狀態良好的胚胎移植到代孕鼠的輸卵管中,共移植瞭200枚受精卵,6隻受體懷孕,最終穫得44隻成年小鼠.通過PCR和Southern blot分析證明,2隻為暘性轉基因小鼠,轉基因暘性率為4%.Southern blot結果分析顯示,外源片段是以多拷貝串聯重複的形式整閤到鼠染色體中.
이CMV-PAAV재체위기출재체,이피부특이인K14(인각단백14)기인계동자체환원질립중적CMV계동자후,재기다극륭위점구삽입서c-Myc기인적cDNA서렬화GFP편마서렬,구건성고효표체c-Myc기인적진핵표체재체.통과쌍원핵현미주사기술,장선성화적재체DNA주입도C57BL6근교계소서(Mus musculus)수정란적2개원핵중,장주사후상태량호적배태이식도대잉서적수란관중,공이식료200매수정란,6지수체부잉,최종획득44지성년소서.통과PCR화Southern blot분석증명,2지위양성전기인소서,전기인양성솔위4%.Southern blot결과분석현시,외원편단시이다고패천련중복적형식정합도서염색체중.
