CAJ | 학술논문

为研究低分子量透明质酸寡糖片段(hyaluronan oligosaccharides,o-HA)对血管内皮细胞生长与迁移的影响,及透明质酸(hyaluronan,HA)受体(CD44与RHAMM)在此过程中的作用,首先通过细胞计数、MTT实验、细胞周期分布及单层细胞损伤模型修复实验,观察o-HA对血管内皮细胞(猪髂总动脉内皮细胞,porcine vascular endothelial cell line,PIEC)增殖及创伤愈合的影响.结果显示,o-HA明显促进血管内皮细胞生长,并且能够促进内皮细胞向创伤区迁移.蛋白质免疫印迹分析证明,o-HA作用于PIECs后,细胞Src激酶、ERK01/2的磷酸化程度增强,c-Myc蛋白、周期蛋白D1表达水平增高.Src激酶特异性的化学抑制荆PP2可轻度抑制ERK-1/2磷酸化;进而通过抗-CD44与抗.RHAMM抗体分别预先封闭细胞表面相应的特异性受体位点后,再用o-HA刺激细胞,探讨HA受体在o-HA介导PIECs信号传导过程中的作用.结果显示,抗CD44抗体不能抑制o-HA介导的ERK-1/2磷酸化;而抗RHAMM抗体可轻度抑制o-HA介导的ERK-1/2磷酸化.结果提示,o-HA具有促进血管内皮细胞增殖及创伤愈合的作用,其机制可能是通过血管内皮细胞表面受体RHAMM实现的.该作用可能通过激活Src激酶及细胞内MAPK(ERK-1/2)信号通路,启动早期反应基因转录,诱使c-Myc蛋白高表达,从而促进血管内皮细胞生长.该作用也可能与上调细胞周期蛋白D1的表达有关.
위연구저분자량투명질산과당편단(hyaluronan oligosaccharides,o-HA)대혈관내피세포생장여천이적영향,급투명질산(hyaluronan,HA)수체(CD44여RHAMM)재차과정중적작용,수선통과세포계수、MTT실험、세포주기분포급단층세포손상모형수복실험,관찰o-HA대혈관내피세포(저가총동맥내피세포,porcine vascular endothelial cell line,PIEC)증식급창상유합적영향.결과현시,o-HA명현촉진혈관내피세포생장,병차능구촉진내피세포향창상구천이.단백질면역인적분석증명,o-HA작용우PIECs후,세포Src격매、ERK01/2적린산화정도증강,c-Myc단백、주기단백D1표체수평증고.Src격매특이성적화학억제형PP2가경도억제ERK-1/2린산화;진이통과항-CD44여항.RHAMM항체분별예선봉폐세포표면상응적특이성수체위점후,재용o-HA자격세포,탐토HA수체재o-HA개도PIECs신호전도과정중적작용.결과현시,항CD44항체불능억제o-HA개도적ERK-1/2린산화;이항RHAMM항체가경도억제o-HA개도적ERK-1/2린산화.결과제시,o-HA구유촉진혈관내피세포증식급창상유합적작용,기궤제가능시통과혈관내피세포표면수체RHAMM실현적.해작용가능통과격활Src격매급세포내MAPK(ERK-1/2)신호통로,계동조기반응기인전록,유사c-Myc단백고표체,종이촉진혈관내피세포생장.해작용야가능여상조세포주기단백D1적표체유관.