重组人载脂蛋白E3在毕赤酵母中的分泌表达及鉴定
중조인재지단백E3재필적효모중적분비표체급감정
  • 万方数据
    中国老年学杂志 중국노년학잡지
    CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
    2009年 7期 841-843 ,共3页

    苏曼曼%陈月%王文佳%许天敏%常伟勤%颜炜群%包晓群

    소만만%진월%왕문가%허천민%상위근%안위군%포효군

    重组人载脂蛋白E3%分泌表达%毕赤酵母 重組人載脂蛋白E3%分泌錶達%畢赤酵母
    중조인재지단백E3%분비표체%필적효모
    目的 在毕赤酵母中高效表达重组人载脂蛋白E3(rhApoE3),制备与天然hApoE3具有相同结构和活性的rhApoE3.方法 用RT-PCR法自人肝组织RNA克隆hApoE3的cDNA,构建真核分泌型表达载体pPICZα/hApoE3.经核酸测序确证后,电转化毕赤酵母菌株X33.甲醇诱导后进行SDS-PAGE、Western印迹分析,筛选高表达工程菌.结果 经PCR法克隆的hApoE3 DNA序列与GenBank登录的序列一致.SDS-PAGE和Western印迹分析均在分子量约34kD出现特异性条带,rhApoE3表达量达150mg/L.结论 在毕赤酵母菌中可经甲醇诱导产生rhApoE3,获得高效表达rhApoE3的毕赤酵母工程菌.
    목적 재필적효모중고효표체중조인재지단백E3(rhApoE3),제비여천연hApoE3구유상동결구화활성적rhApoE3.방법 용RT-PCR법자인간조직RNA극륭hApoE3적cDNA,구건진핵분비형표체재체pPICZα/hApoE3.경핵산측서학증후,전전화필적효모균주X33.갑순유도후진행SDS-PAGE、Western인적분석,사선고표체공정균.결과 경PCR법극륭적hApoE3 DNA서렬여GenBank등록적서렬일치.SDS-PAGE화Western인적분석균재분자량약34kD출현특이성조대,rhApoE3표체량체150mg/L.결론 재필적효모균중가경갑순유도산생rhApoE3,획득고효표체rhApoE3적필적효모공정균.
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