中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2010年
24期
3736-3739
,共4页
申强%于音%陈莫%姜涛%邵佳甲
申彊%于音%陳莫%薑濤%邵佳甲
신강%우음%진막%강도%소가갑
腺病毒%启动子%胶质瘤
腺病毒%啟動子%膠質瘤
선병독%계동자%효질류
目的 构建COX-2启动子携带E1A的条件复制性腺病毒,为今后利用Ad-COX-2-E1A治疗脑胶质瘤奠定基础.方法 ①pRsetB-E1A原核表达质粒的构建;②重组E1A蛋白的表达和纯化;③多克隆抗体的制备和抗体检测;④实验细胞COX-2表达水平的检测;⑤重组腺病毒质粒的构建及鉴定.结果 ①E1蛋白能够被有效表达,抗-E1A多克隆抗体滴度很高;②通过流式细胞仪和RT-PCR两种方法,在脑胶质瘤细胞A-172、LN-18中均检测到了较高水平的COX-2活性;③成功构建了重组腺病毒Ad-COX-2-E1A,并从基因和蛋白水平对其进行了鉴定.结论 Ad-COX-2-E1A被成功构建并具有良好的表达活性,可以作为今后胶质瘤基因治疗的良好载体.
目的 構建COX-2啟動子攜帶E1A的條件複製性腺病毒,為今後利用Ad-COX-2-E1A治療腦膠質瘤奠定基礎.方法 ①pRsetB-E1A原覈錶達質粒的構建;②重組E1A蛋白的錶達和純化;③多剋隆抗體的製備和抗體檢測;④實驗細胞COX-2錶達水平的檢測;⑤重組腺病毒質粒的構建及鑒定.結果 ①E1蛋白能夠被有效錶達,抗-E1A多剋隆抗體滴度很高;②通過流式細胞儀和RT-PCR兩種方法,在腦膠質瘤細胞A-172、LN-18中均檢測到瞭較高水平的COX-2活性;③成功構建瞭重組腺病毒Ad-COX-2-E1A,併從基因和蛋白水平對其進行瞭鑒定.結論 Ad-COX-2-E1A被成功構建併具有良好的錶達活性,可以作為今後膠質瘤基因治療的良好載體.
목적 구건COX-2계동자휴대E1A적조건복제성선병독,위금후이용Ad-COX-2-E1A치료뇌효질류전정기출.방법 ①pRsetB-E1A원핵표체질립적구건;②중조E1A단백적표체화순화;③다극륭항체적제비화항체검측;④실험세포COX-2표체수평적검측;⑤중조선병독질립적구건급감정.결과 ①E1단백능구피유효표체,항-E1A다극륭항체적도흔고;②통과류식세포의화RT-PCR량충방법,재뇌효질류세포A-172、LN-18중균검측도료교고수평적COX-2활성;③성공구건료중조선병독Ad-COX-2-E1A,병종기인화단백수평대기진행료감정.결론 Ad-COX-2-E1A피성공구건병구유량호적표체활성,가이작위금후효질류기인치료적량호재체.
