重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2011年
23期
2341-2342,2345,后插二
,共4页
蒋玉凤%刘加群%张建军%孙华丽%黄飞
蔣玉鳳%劉加群%張建軍%孫華麗%黃飛
장옥봉%류가군%장건군%손화려%황비
金属蛋白酶类%RNA干扰%质粒%肝纤维化%生长因子
金屬蛋白酶類%RNA榦擾%質粒%肝纖維化%生長因子
금속단백매류%RNA간우%질립%간섬유화%생장인자
目的 构建以大鼠结缔组织生长因子(CTGF)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)基因为靶点的短发夹RNA(shRNA)表达质粒.方法 根据前期筛选出的对CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA干扰靶位,各设计一对有短发夹结构的RNA干扰(RNAi)靶点序列,退火形成双链DNA,克隆到质粒载体psiRNA-h7SKGFPzeo;构建重组质粒载体psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP-TIMP-1,并进行酶切与测序鉴定.结果 酶切与序列测定均提示重组质粒psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP- TIMP-1构建成功.结论 成功构建靶向大鼠CTGF和TIMP-1最有效的RNAi靶位的shRNA表达质粒,为进一步探索肝纤维化基因治疗的新途径打下了实验基础.
目的 構建以大鼠結締組織生長因子(CTGF)和金屬蛋白酶組織抑製因子1(TIMP-1)基因為靶點的短髮夾RNA(shRNA)錶達質粒.方法 根據前期篩選齣的對CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA榦擾靶位,各設計一對有短髮夾結構的RNA榦擾(RNAi)靶點序列,退火形成雙鏈DNA,剋隆到質粒載體psiRNA-h7SKGFPzeo;構建重組質粒載體psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP-TIMP-1,併進行酶切與測序鑒定.結果 酶切與序列測定均提示重組質粒psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP- TIMP-1構建成功.結論 成功構建靶嚮大鼠CTGF和TIMP-1最有效的RNAi靶位的shRNA錶達質粒,為進一步探索肝纖維化基因治療的新途徑打下瞭實驗基礎.
목적 구건이대서결체조직생장인자(CTGF)화금속단백매조직억제인자1(TIMP-1)기인위파점적단발협RNA(shRNA)표체질립.방법 근거전기사선출적대CTGF화TIMP-1기인최유효적RNA간우파위,각설계일대유단발협결구적RNA간우(RNAi)파점서렬,퇴화형성쌍련DNA,극륭도질립재체psiRNA-h7SKGFPzeo;구건중조질립재체psiRNA-GFP-CTGF화psiRNA-GFP-TIMP-1,병진행매절여측서감정.결과 매절여서렬측정균제시중조질립psiRNA-GFP-CTGF화psiRNA-GFP- TIMP-1구건성공.결론 성공구건파향대서CTGF화TIMP-1최유효적RNAi파위적shRNA표체질립,위진일보탐색간섬유화기인치료적신도경타하료실험기출.
