生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
1期
38-41
,共4页
李邦印%孙卫国%王仲元%胡永亮%苏锐%李国利%程小星
李邦印%孫衛國%王仲元%鬍永亮%囌銳%李國利%程小星
리방인%손위국%왕중원%호영량%소예%리국리%정소성
结核分枝杆菌%HspX蛋白%可溶性表达%抗原性分析
結覈分枝桿菌%HspX蛋白%可溶性錶達%抗原性分析
결핵분지간균%HspX단백%가용성표체%항원성분석
目的:利用原核系统可溶性表达结核分枝杆菌HspX蛋白并进行纯化,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性.方法:采用PCR方法,从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增HspX核酸序列,克隆至原核表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌BL21 (DE3)进行诱导、表达和纯化,用Western印迹初步评价HspX的抗原性.结果:经IPTG诱导,HspX蛋白在原核系统内获得了可溶性表达,经镍柱亲和层析获得了纯度达95％以上的重组蛋白.Western印迹结果证明重组HspX蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应.结论:重组蛋白HspX在大肠杆菌中以可溶性形式表达,高纯度的重组融合蛋白有可能成为结核病的血清学诊断抗原.
目的:利用原覈繫統可溶性錶達結覈分枝桿菌HspX蛋白併進行純化,通過免疫印跡反應初步鑒定重組蛋白的抗原性和特異性.方法:採用PCR方法,從結覈分枝桿菌H37Rv基因組中擴增HspX覈痠序列,剋隆至原覈錶達載體pET-28a中,轉入大腸桿菌BL21 (DE3)進行誘導、錶達和純化,用Western印跡初步評價HspX的抗原性.結果:經IPTG誘導,HspX蛋白在原覈繫統內穫得瞭可溶性錶達,經鎳柱親和層析穫得瞭純度達95％以上的重組蛋白.Western印跡結果證明重組HspX蛋白與結覈病患者血清標本呈彊暘性反應,與健康人血清標本呈陰性反應.結論:重組蛋白HspX在大腸桿菌中以可溶性形式錶達,高純度的重組融閤蛋白有可能成為結覈病的血清學診斷抗原.
목적:이용원핵계통가용성표체결핵분지간균HspX단백병진행순화,통과면역인적반응초보감정중조단백적항원성화특이성.방법:채용PCR방법,종결핵분지간균H37Rv기인조중확증HspX핵산서렬,극륭지원핵표체재체pET-28a중,전입대장간균BL21 (DE3)진행유도、표체화순화,용Western인적초보평개HspX적항원성.결과:경IPTG유도,HspX단백재원핵계통내획득료가용성표체,경얼주친화층석획득료순도체95％이상적중조단백.Western인적결과증명중조HspX단백여결핵병환자혈청표본정강양성반응,여건강인혈청표본정음성반응.결론:중조단백HspX재대장간균중이가용성형식표체,고순도적중조융합단백유가능성위결핵병적혈청학진단항원.
