CAJ | 학술논문

试验旨在摸索猪卵母细胞孤雌激活的电场强度和脉冲时间,并探索渗透压阶段培养法对孤雌胚胎后期发育的影响.猪卵母细胞成熟培养42～44 h后,分别在电场强度2.1、2.3、2.5 kV/mm和脉冲时间30、60、90 μs的9组电激活参数下进行孤雌激活试验；卵母细胞在2.1 kV/mm和30μs的参数下进行孤雌激活后,分别培养于渗透压为271、280、290、302mOsm的PZM-3中,48 h后移入渗透压280 mOsm的PZM-3中继续培养96 h；孤雌胚胎于电激活后先在含2 mmol/L 6-DMAP的PZM-3中培养4～6 h,然后移入不含6-DMAP的PZM-3中继续培养.试验结果表明,电场强度和脉冲时间两个参数间无显著的交互作用(P＞0.05),脉冲时间相同条件下,卵裂率在不同电场强度条件下均无显著差异(P＞0.05),2.1和2.5kV/mm的电场强度条件下,脉冲时间为30μs时的卵裂率显著高于60和90 μs(P＜0.05),而2.3 kV/mm电场强度下3个脉冲时间试验组的卵裂率无显著差异(P＞0.05),各试验组的囊胚率无显著差异(P＞0.05)；孤雌胚胎在渗透压为290～310mOsm的PZM-3中培养48 h,卵裂率得到显著提高(P＜0.05),渗透压对囊胚率无显著影响(P＞0.05)；6-DMAP对孤雌胚胎卵裂率无显著影响(P＞0.05),但可以显著提高囊胚率(P＜0.05).结果提示,猪卵母细胞孤雌激活需要较高的电场强度(2.1～2.3 kV/mm)而脉冲时间不宜过长(30 μs)；48 h的高渗培养和6-DMAP的辅助激活有助于孤雌胚胎的后期发育.
시험지재모색저란모세포고자격활적전장강도화맥충시간,병탐색삼투압계단배양법대고자배태후기발육적영향.저란모세포성숙배양42～44 h후,분별재전장강도2.1、2.3、2.5 kV/mm화맥충시간30、60、90 μs적9조전격활삼수하진행고자격활시험；란모세포재2.1 kV/mm화30μs적삼수하진행고자격활후,분별배양우삼투압위271、280、290、302mOsm적PZM-3중,48 h후이입삼투압280 mOsm적PZM-3중계속배양96 h；고자배태우전격활후선재함2 mmol/L 6-DMAP적PZM-3중배양4～6 h,연후이입불함6-DMAP적PZM-3중계속배양.시험결과표명,전장강도화맥충시간량개삼수간무현저적교호작용(P＞0.05),맥충시간상동조건하,란렬솔재불동전장강도조건하균무현저차이(P＞0.05),2.1화2.5kV/mm적전장강도조건하,맥충시간위30μs시적란렬솔현저고우60화90 μs(P＜0.05),이2.3 kV/mm전장강도하3개맥충시간시험조적란렬솔무현저차이(P＞0.05),각시험조적낭배솔무현저차이(P＞0.05)；고자배태재삼투압위290～310mOsm적PZM-3중배양48 h,란렬솔득도현저제고(P＜0.05),삼투압대낭배솔무현저영향(P＞0.05)；6-DMAP대고자배태란렬솔무현저영향(P＞0.05),단가이현저제고낭배솔(P＜0.05).결과제시,저란모세포고자격활수요교고적전장강도(2.1～2.3 kV/mm)이맥충시간불의과장(30 μs)；48 h적고삼배양화6-DMAP적보조격활유조우고자배태적후기발육.