哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
3期
222-226
,共5页
李云龙%郭欣%杨晓波%黄跃南
李雲龍%郭訢%楊曉波%黃躍南
리운룡%곽흔%양효파%황약남
胎猪%导管细胞%干细胞%胰岛素
胎豬%導管細胞%榦細胞%胰島素
태저%도관세포%간세포%이도소
目的 建立胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定的方法.方法 采用胰酶和胶原酶Ⅳ、P消化法分离获得细胞,在含10％胎牛血清的M199培养基中行导管上皮细胞原代培养,而后将血清浓度提高到20％以上继续培养,3～4天后至每个小圆细胞形成一个集落;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)的方法对获得的细胞检测CK19、Pdx-1、NeuroD/Beta2、insulin、Glut-2等基因的表达.结果 成功分离获得胎猪胰腺导管细胞,并证实该细胞为胎猪导管源胰腺干细胞.经检测,细胞表达CK19,Pdx-1,Ght-2,NeuroD/Beta2等胰腺干细胞的标志,而insulin、Neurogenin3阴性表达.结论 该方法可较好地分离纯化出胎猪胰腺导管细胞,经鉴定获得细胞具有胰腺干细胞的特性.
目的 建立胎豬胰腺導管榦細胞的體外分離、純化、培養及鑒定的方法.方法 採用胰酶和膠原酶Ⅳ、P消化法分離穫得細胞,在含10％胎牛血清的M199培養基中行導管上皮細胞原代培養,而後將血清濃度提高到20％以上繼續培養,3～4天後至每箇小圓細胞形成一箇集落;採用逆轉錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)的方法對穫得的細胞檢測CK19、Pdx-1、NeuroD/Beta2、insulin、Glut-2等基因的錶達.結果 成功分離穫得胎豬胰腺導管細胞,併證實該細胞為胎豬導管源胰腺榦細胞.經檢測,細胞錶達CK19,Pdx-1,Ght-2,NeuroD/Beta2等胰腺榦細胞的標誌,而insulin、Neurogenin3陰性錶達.結論 該方法可較好地分離純化齣胎豬胰腺導管細胞,經鑒定穫得細胞具有胰腺榦細胞的特性.
목적 건립태저이선도관간세포적체외분리、순화、배양급감정적방법.방법 채용이매화효원매Ⅳ、P소화법분리획득세포,재함10％태우혈청적M199배양기중행도관상피세포원대배양,이후장혈청농도제고도20％이상계속배양,3～4천후지매개소원세포형성일개집락;채용역전록-다취매련반응(RT-PCR)적방법대획득적세포검측CK19、Pdx-1、NeuroD/Beta2、insulin、Glut-2등기인적표체.결과 성공분리획득태저이선도관세포,병증실해세포위태저도관원이선간세포.경검측,세포표체CK19,Pdx-1,Ght-2,NeuroD/Beta2등이선간세포적표지,이insulin、Neurogenin3음성표체.결론 해방법가교호지분리순화출태저이선도관세포,경감정획득세포구유이선간세포적특성.
