中西医结合肝病杂志
中西醫結閤肝病雜誌
중서의결합간병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE ON LIVER DISEASES
2003年
2期
89-91
,共3页
钟彦伟%成军%焦成松%张忠东%李强%李莉%陈菊梅
鐘彥偉%成軍%焦成鬆%張忠東%李彊%李莉%陳菊梅
종언위%성군%초성송%장충동%리강%리리%진국매
医学细胞生物学%人体免疫学%肝炎病毒,丙型%非结构蛋白%单链抗体%免疫组织化学%细菌噬菌体
醫學細胞生物學%人體免疫學%肝炎病毒,丙型%非結構蛋白%單鏈抗體%免疫組織化學%細菌噬菌體
의학세포생물학%인체면역학%간염병독,병형%비결구단백%단련항체%면역조직화학%세균서균체
目的:研制抗丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A的人源噬菌体单链可变区抗体,并探讨其在临床病理学诊断中的应用价值.方法:以大肠杆菌表达的重组HCV非结构蛋白NS5A为固相抗原,利用抗原-抗体亲和性结合的原理,从半合成的人源可变区噬菌体抗体库中经过5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程及酶联免疫吸附试验(ELISA)和DNA序列分析,获得HCV NS5A的人源单链抗体;用该抗体对7721转染全长HCV cDNA后筛选的阳性克隆细胞中的HCV NS5A抗原进行免疫组化鉴定.结果:ELISA结果表明,制备的HCV NS5A人源单链抗体能与HCVNS5A抗原特异性结合;免疫组化结果表明,该抗体能够特异性识别HCV NS5A抗原,与正常肝细胞无交叉反应.结论:此法制备的单链抗体亲和性好,特异性强,且制备方法简便,周期短,为HCV NS5A病原的检测提供了新的有效的检测手段.
目的:研製抗丙型肝炎病毒(HCV)非結構蛋白NS5A的人源噬菌體單鏈可變區抗體,併探討其在臨床病理學診斷中的應用價值.方法:以大腸桿菌錶達的重組HCV非結構蛋白NS5A為固相抗原,利用抗原-抗體親和性結閤的原理,從半閤成的人源可變區噬菌體抗體庫中經過5輪"吸附-洗脫-擴增"的篩選過程及酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和DNA序列分析,穫得HCV NS5A的人源單鏈抗體;用該抗體對7721轉染全長HCV cDNA後篩選的暘性剋隆細胞中的HCV NS5A抗原進行免疫組化鑒定.結果:ELISA結果錶明,製備的HCV NS5A人源單鏈抗體能與HCVNS5A抗原特異性結閤;免疫組化結果錶明,該抗體能夠特異性識彆HCV NS5A抗原,與正常肝細胞無交扠反應.結論:此法製備的單鏈抗體親和性好,特異性彊,且製備方法簡便,週期短,為HCV NS5A病原的檢測提供瞭新的有效的檢測手段.
목적:연제항병형간염병독(HCV)비결구단백NS5A적인원서균체단련가변구항체,병탐토기재림상병이학진단중적응용개치.방법:이대장간균표체적중조HCV비결구단백NS5A위고상항원,이용항원-항체친화성결합적원리,종반합성적인원가변구서균체항체고중경과5륜"흡부-세탈-확증"적사선과정급매련면역흡부시험(ELISA)화DNA서렬분석,획득HCV NS5A적인원단련항체;용해항체대7721전염전장HCV cDNA후사선적양성극륭세포중적HCV NS5A항원진행면역조화감정.결과:ELISA결과표명,제비적HCV NS5A인원단련항체능여HCVNS5A항원특이성결합;면역조화결과표명,해항체능구특이성식별HCV NS5A항원,여정상간세포무교차반응.결론:차법제비적단련항체친화성호,특이성강,차제비방법간편,주기단,위HCV NS5A병원적검측제공료신적유효적검측수단.
