中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2001年
2期
237-243
,共7页
刘晓勤%张成岗%邢桂春%陈清棠%贺福初
劉曉勤%張成崗%邢桂春%陳清棠%賀福初
류효근%장성강%형계춘%진청당%하복초
ADP核糖基化因子%GTP酶活化蛋白%亚细胞定位%分泌型碱性磷酸酶
ADP覈糖基化因子%GTP酶活化蛋白%亞細胞定位%分泌型堿性燐痠酶
ADP핵당기화인자%GTP매활화단백%아세포정위%분비형감성린산매
ARF GAP是重要的细胞内物质转运调节分子.最近,在人胎肝cDNA文库中发现一种新基因,其编码的氨基酸序列与大鼠的ARF1 GAP有32%同源性,故将其命名为"ARFGAP1”.对ARFGAP1进行功能研究,利用分子克隆技术构建绿色荧光蛋白(GFP)-ARFGAP1融合基因表达质粒(pEGFP-C1-ARFGAP1,经脂质体转染将其导入COS-7细胞瞬时表达,利用绿色荧光确定ARFGAP1的亚细胞定位.结果显示,ARFGAP1位于细胞质部分,表达量高时,在核周高尔基体区聚集呈团块状或颗粒状.构建真核表达质粒pcDNA3.1/myc-His-ARFGAn,在COS-7细胞中表达,并用ARFGAP1和分泌型碱性磷酸酶(SEAP)真核表达质粒共同转染COS-7细胞,发现ARFGAP1在细胞中过表达能部分抑制SEAP的分泌.结果证明,ARFGAP1对细胞的物质转运和分泌功能有调节作用.
ARF GAP是重要的細胞內物質轉運調節分子.最近,在人胎肝cDNA文庫中髮現一種新基因,其編碼的氨基痠序列與大鼠的ARF1 GAP有32%同源性,故將其命名為"ARFGAP1”.對ARFGAP1進行功能研究,利用分子剋隆技術構建綠色熒光蛋白(GFP)-ARFGAP1融閤基因錶達質粒(pEGFP-C1-ARFGAP1,經脂質體轉染將其導入COS-7細胞瞬時錶達,利用綠色熒光確定ARFGAP1的亞細胞定位.結果顯示,ARFGAP1位于細胞質部分,錶達量高時,在覈週高爾基體區聚集呈糰塊狀或顆粒狀.構建真覈錶達質粒pcDNA3.1/myc-His-ARFGAn,在COS-7細胞中錶達,併用ARFGAP1和分泌型堿性燐痠酶(SEAP)真覈錶達質粒共同轉染COS-7細胞,髮現ARFGAP1在細胞中過錶達能部分抑製SEAP的分泌.結果證明,ARFGAP1對細胞的物質轉運和分泌功能有調節作用.
ARF GAP시중요적세포내물질전운조절분자.최근,재인태간cDNA문고중발현일충신기인,기편마적안기산서렬여대서적ARF1 GAP유32%동원성,고장기명명위"ARFGAP1”.대ARFGAP1진행공능연구,이용분자극륭기술구건록색형광단백(GFP)-ARFGAP1융합기인표체질립(pEGFP-C1-ARFGAP1,경지질체전염장기도입COS-7세포순시표체,이용록색형광학정ARFGAP1적아세포정위.결과현시,ARFGAP1위우세포질부분,표체량고시,재핵주고이기체구취집정단괴상혹과립상.구건진핵표체질립pcDNA3.1/myc-His-ARFGAn,재COS-7세포중표체,병용ARFGAP1화분비형감성린산매(SEAP)진핵표체질립공동전염COS-7세포,발현ARFGAP1재세포중과표체능부분억제SEAP적분비.결과증명,ARFGAP1대세포적물질전운화분비공능유조절작용.
