实验生物学报
實驗生物學報
실험생물학보
ACTA BIOLOGIAE EXPERIMENTLIS SINICA
2004年
1期
1-8
,共8页
VEGF%免疫组织化学%PAS染色%蛋白质免疫印迹%睾丸%附睾%大鼠
VEGF%免疫組織化學%PAS染色%蛋白質免疫印跡%睪汍%附睪%大鼠
VEGF%면역조직화학%PAS염색%단백질면역인적%고환%부고%대서
为探讨血管内皮生长因子(VEGF)在雄性生殖系精子发生发育和成熟过程中的调控作用,应用免疫组化、Periodic acid-Schiff(PAS)染色及蛋白质免疫印迹技术,检测VEGF蛋白在成年大鼠睾丸和附睾的表达和定位情况.Western-blots显示,在大鼠睾丸和附睾内均有VEGF蛋白(约45kD)的表达;免疫组化显示,睾丸内VEGF见于圆形和长形精子细胞、Sertoli细胞和Leydig细胞,免疫阳性产物位于细胞质内.精子细胞的VEGF表达伴随精子细胞顶体发育的全过程,精子残余体呈强阳性.附睾内VEGF表达于附睾管上皮,且有区域和细胞特异性.附睾起始段的所有上皮主细胞内都有VEGF阳性颗粒;头、体、尾各段的VEGF阳性细胞多数与含PAS阳性颗粒的细胞重合,证明为亮细胞;近端附睾的管腔内可见精子头部呈VEGF阳性染色.睾丸、附睾间质血管内皮为VEGF阴性.上述结果表明,VEGF蛋白可由生殖细胞和附睾管上皮细胞直接产生,它可能以自分泌和/或旁分泌的形式共同作用于睾丸和附睾的生殖细胞和血管内皮,直接或间接影响精子的发生、发育和成熟过程,特别是精子顶体的形成过程,并可能与精子在附睾内的成熟有关.
為探討血管內皮生長因子(VEGF)在雄性生殖繫精子髮生髮育和成熟過程中的調控作用,應用免疫組化、Periodic acid-Schiff(PAS)染色及蛋白質免疫印跡技術,檢測VEGF蛋白在成年大鼠睪汍和附睪的錶達和定位情況.Western-blots顯示,在大鼠睪汍和附睪內均有VEGF蛋白(約45kD)的錶達;免疫組化顯示,睪汍內VEGF見于圓形和長形精子細胞、Sertoli細胞和Leydig細胞,免疫暘性產物位于細胞質內.精子細胞的VEGF錶達伴隨精子細胞頂體髮育的全過程,精子殘餘體呈彊暘性.附睪內VEGF錶達于附睪管上皮,且有區域和細胞特異性.附睪起始段的所有上皮主細胞內都有VEGF暘性顆粒;頭、體、尾各段的VEGF暘性細胞多數與含PAS暘性顆粒的細胞重閤,證明為亮細胞;近耑附睪的管腔內可見精子頭部呈VEGF暘性染色.睪汍、附睪間質血管內皮為VEGF陰性.上述結果錶明,VEGF蛋白可由生殖細胞和附睪管上皮細胞直接產生,它可能以自分泌和/或徬分泌的形式共同作用于睪汍和附睪的生殖細胞和血管內皮,直接或間接影響精子的髮生、髮育和成熟過程,特彆是精子頂體的形成過程,併可能與精子在附睪內的成熟有關.
위탐토혈관내피생장인자(VEGF)재웅성생식계정자발생발육화성숙과정중적조공작용,응용면역조화、Periodic acid-Schiff(PAS)염색급단백질면역인적기술,검측VEGF단백재성년대서고환화부고적표체화정위정황.Western-blots현시,재대서고환화부고내균유VEGF단백(약45kD)적표체;면역조화현시,고환내VEGF견우원형화장형정자세포、Sertoli세포화Leydig세포,면역양성산물위우세포질내.정자세포적VEGF표체반수정자세포정체발육적전과정,정자잔여체정강양성.부고내VEGF표체우부고관상피,차유구역화세포특이성.부고기시단적소유상피주세포내도유VEGF양성과립;두、체、미각단적VEGF양성세포다수여함PAS양성과립적세포중합,증명위량세포;근단부고적관강내가견정자두부정VEGF양성염색.고환、부고간질혈관내피위VEGF음성.상술결과표명,VEGF단백가유생식세포화부고관상피세포직접산생,타가능이자분비화/혹방분비적형식공동작용우고환화부고적생식세포화혈관내피,직접혹간접영향정자적발생、발육화성숙과정,특별시정자정체적형성과정,병가능여정자재부고내적성숙유관.