CAJ | 학술논문

目的:研究雷公藤内酯醇对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)增殖和表达环氧化酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及合成前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)的影响,并探讨其机制.方法:分离培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞,用TNFα(20 μg/L)刺激,同时加或不加雷公藤内酯醇(TP,0～100 μg/L).分别用3H-TdR法、竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)和硝酸酶还原法、半定量逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)法、细胞酶免疫法及蛋白免疫印迹(Western-blot)法,检测滑膜细胞的增殖活性、细胞培养上清液中PGE2和NO的水平,滑膜细胞COX-2和iNOS mRNA表达水平及蛋白表达水平.同时提取各组细胞蛋白,测定其核转录因子NF-κB活性.结果:TP(>20 μg/L)能显著抑制TNFα诱导的RASF COX-2和iNOS表达,并明显减少PGE2和NO的生成,抑制作用与TP浓度呈明显相关性.同时观察到,TP对TNFα激活的RASF核转录因子NF-κB活性有明显的抑制作用(IC50≈35 μg/L),TP对RASF NF-κB活性的抑制程度与其抑制RASF COX-2和iNOS表达的效应相一致.实验未观察到TP对RASF增殖的影响.结论:TP可显著抑制TNFα刺激的RASF COX-2和iNOS的表达及其诱导产物PGE2和NO的生成,这种作用可能通过TP抑制RASF NF-κB的活性而实现.
목적:연구뢰공등내지순대류풍습관절염활막성섬유세포(RASF)증식화표체배양화매-2(COX-2)、유도형일양화담합매(iNOS)급합성전렬선소E2(PGE2)、일양화담(NO)적영향,병탐토기궤제.방법:분리배양인류풍습관절염활막성섬유세포,용TNFα(20 μg/L)자격,동시가혹불가뢰공등내지순(TP,0～100 μg/L).분별용3H-TdR법、경쟁매련면역흡부시험(ELISA)화초산매환원법、반정량역전록-취합매련반응(RT-PCR)법、세포매면역법급단백면역인적(Western-blot)법,검측활막세포적증식활성、세포배양상청액중PGE2화NO적수평,활막세포COX-2화iNOS mRNA표체수평급단백표체수평.동시제취각조세포단백,측정기핵전록인자NF-κB활성.결과:TP(>20 μg/L)능현저억제TNFα유도적RASF COX-2화iNOS표체,병명현감소PGE2화NO적생성,억제작용여TP농도정명현상관성.동시관찰도,TP대TNFα격활적RASF핵전록인자NF-κB활성유명현적억제작용(IC50≈35 μg/L),TP대RASF NF-κB활성적억제정도여기억제RASF COX-2화iNOS표체적효응상일치.실험미관찰도TP대RASF증식적영향.결론:TP가현저억제TNFα자격적RASF COX-2화iNOS적표체급기유도산물PGE2화NO적생성,저충작용가능통과TP억제RASF NF-κB적활성이실현.