热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2005年
6期
729-733
,共5页
韦相才%马芸%邓新燕%卢丽%黄冰%陈系古
韋相纔%馬蕓%鄧新燕%盧麗%黃冰%陳繫古
위상재%마예%산신연%로려%황빙%진계고
荧光定量RT-PCR%人地中海贫血%β654珠蛋白基因%转基因小鼠%mRNA
熒光定量RT-PCR%人地中海貧血%β654珠蛋白基因%轉基因小鼠%mRNA
형광정량RT-PCR%인지중해빈혈%β654주단백기인%전기인소서%mRNA
目的采用荧光定量RT-PCR技术检测所制作的人地中海贫血β654珠蛋白基因转基因小鼠模型mRNA的表达情况,评价该技术应用于小鼠mRNA分析的价值.方法根据GenBank小鼠mRNA序列,设计用于扩增小鼠mRNA的引物和反向探针,构建荧光定量RT-PCR技术.实验分两组,分别对转基因小鼠和正常小鼠中mRNA进行检测.采用SPSS统计软件,分析和比较两组动物中mRNA的表达量及表达的稳定性.结果所检测的¨只转基因阳性小鼠中检测出人β654珠蛋白基因mRNA和小鼠内源性mRNA;而在33只正常小鼠中只检测到小鼠内源性mRNA.荧光定量RT-PCR技术可检测到105拷贝数的人β654珠蛋白基因mRNA和115拷贝数的小鼠内源性mRNA.荧光定量RT-PCR技术分别在F1代和F2转基因阳性小鼠中稳定地检测到,表明转基因小鼠mRNA获得稳定表达.结论所构建的荧光定量RT-PCR技术分析转基因小鼠mRNA表达具有检测定量、敏感、高效快捷的特点,该方法在鉴定和评估转基因小鼠mRNA的表达中稳定性好、定量准确,具有非常重要的应用价值.
目的採用熒光定量RT-PCR技術檢測所製作的人地中海貧血β654珠蛋白基因轉基因小鼠模型mRNA的錶達情況,評價該技術應用于小鼠mRNA分析的價值.方法根據GenBank小鼠mRNA序列,設計用于擴增小鼠mRNA的引物和反嚮探針,構建熒光定量RT-PCR技術.實驗分兩組,分彆對轉基因小鼠和正常小鼠中mRNA進行檢測.採用SPSS統計軟件,分析和比較兩組動物中mRNA的錶達量及錶達的穩定性.結果所檢測的¨隻轉基因暘性小鼠中檢測齣人β654珠蛋白基因mRNA和小鼠內源性mRNA;而在33隻正常小鼠中隻檢測到小鼠內源性mRNA.熒光定量RT-PCR技術可檢測到105拷貝數的人β654珠蛋白基因mRNA和115拷貝數的小鼠內源性mRNA.熒光定量RT-PCR技術分彆在F1代和F2轉基因暘性小鼠中穩定地檢測到,錶明轉基因小鼠mRNA穫得穩定錶達.結論所構建的熒光定量RT-PCR技術分析轉基因小鼠mRNA錶達具有檢測定量、敏感、高效快捷的特點,該方法在鑒定和評估轉基因小鼠mRNA的錶達中穩定性好、定量準確,具有非常重要的應用價值.
목적채용형광정량RT-PCR기술검측소제작적인지중해빈혈β654주단백기인전기인소서모형mRNA적표체정황,평개해기술응용우소서mRNA분석적개치.방법근거GenBank소서mRNA서렬,설계용우확증소서mRNA적인물화반향탐침,구건형광정량RT-PCR기술.실험분량조,분별대전기인소서화정상소서중mRNA진행검측.채용SPSS통계연건,분석화비교량조동물중mRNA적표체량급표체적은정성.결과소검측적¨지전기인양성소서중검측출인β654주단백기인mRNA화소서내원성mRNA;이재33지정상소서중지검측도소서내원성mRNA.형광정량RT-PCR기술가검측도105고패수적인β654주단백기인mRNA화115고패수적소서내원성mRNA.형광정량RT-PCR기술분별재F1대화F2전기인양성소서중은정지검측도,표명전기인소서mRNA획득은정표체.결론소구건적형광정량RT-PCR기술분석전기인소서mRNA표체구유검측정량、민감、고효쾌첩적특점,해방법재감정화평고전기인소서mRNA적표체중은정성호、정량준학,구유비상중요적응용개치.
