CAJ | 학술논문

根据GenBank中SjFer序列设计1对特异引物,以日本血吸虫(Schistosoma japonicum)cDNA文库为模板扩增SjFer基因,常规方法构建质粒pcDNA3.0/SjFer、pcDNA3.0/GM-CSF及pcDNA3.0/SjFer-GM-CSF.85只昆明小鼠分A、B、C、D和E组,分别于0、2和4周通过左后肢股四头肌注射生理盐水50 μL/只,质粒50 μg/只.感染前和每次免疫前采血收集血清,ELISA检测特异性IgG水平.末次免疫后2周每组随机宰杀小鼠5只无菌取脾,MTT法检测淋巴细胞增殖情况,取免疫部位的肌肉组织通过免疫组化检查重组质粒在小鼠肌细胞内表达情况.末次免疫后2周每只小鼠贴壁感染40±1条尾蚴,45 d后宰杀观察减虫率和减卵率.结果表明,重组质粒能在小鼠肌细胞内表达;A、B和C组IgG水平变化不明显,D组和E组可诱导小鼠IgG水平升高,且E组高于D组.淋巴细胞转化试验结果A、B和C组OD570变化不明显,彼此无显著差异,D组和E组脾淋巴细胞转化率明显增加,与对照组差异显著,且E组OD570明显高于D组.D组和E组可诱导小鼠产生36.27%和39.22%的减虫率、36.10%和49.04%的减卵率.GM-CSF可增强体液和细胞免疫应答并显著增强pcDNA3.0/SjFer的免疫保护力.
근거GenBank중SjFer서렬설계1대특이인물,이일본혈흡충(Schistosoma japonicum)cDNA문고위모판확증SjFer기인,상규방법구건질립pcDNA3.0/SjFer、pcDNA3.0/GM-CSF급pcDNA3.0/SjFer-GM-CSF.85지곤명소서분A、B、C、D화E조,분별우0、2화4주통과좌후지고사두기주사생리염수50 μL/지,질립50 μg/지.감염전화매차면역전채혈수집혈청,ELISA검측특이성IgG수평.말차면역후2주매조수궤재살소서5지무균취비,MTT법검측림파세포증식정황,취면역부위적기육조직통과면역조화검사중조질립재소서기세포내표체정황.말차면역후2주매지소서첩벽감염40±1조미유,45 d후재살관찰감충솔화감란솔.결과표명,중조질립능재소서기세포내표체;A、B화C조IgG수평변화불명현,D조화E조가유도소서IgG수평승고,차E조고우D조.림파세포전화시험결과A、B화C조OD570변화불명현,피차무현저차이,D조화E조비림파세포전화솔명현증가,여대조조차이현저,차E조OD570명현고우D조.D조화E조가유도소서산생36.27%화39.22%적감충솔、36.10%화49.04%적감란솔.GM-CSF가증강체액화세포면역응답병현저증강pcDNA3.0/SjFer적면역보호력.