微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2008年
2期
256-260
,共5页
李志平%江贤章%田宝玉%舒正玉%黄建忠
李誌平%江賢章%田寶玉%舒正玉%黃建忠
리지평%강현장%전보옥%서정옥%황건충
裂殖壶菌%酰基载体蛋白%二十二碳六烯酸
裂殖壺菌%酰基載體蛋白%二十二碳六烯痠
렬식호균%선기재체단백%이십이탄륙희산
ACP(Acyl carrier protein,酰基载体蛋白)参与高度不饱和脂肪酸的PKS(Polyketide synthase)生物合成途径.从Schizochytrium sp.FJU-512 cDNA文库中获得了ACP基因的cDNA克隆.该序列开放读码框全长429 bp,编码142个氨基酸,等电点为5.04,具有4'-磷酸泛酰巯基乙胺(4'-PP)的结合位点.利用BamH Ⅰ/Hind Ⅲ双酶切,并连接到原核表达载体pET-30a,构建了pET-30a/acp表达载体,转化宿主菌E.coll BL21(DE3),IPTG诱导表达.SDS-PAGE分析表明该蛋白得到高效表达.
ACP(Acyl carrier protein,酰基載體蛋白)參與高度不飽和脂肪痠的PKS(Polyketide synthase)生物閤成途徑.從Schizochytrium sp.FJU-512 cDNA文庫中穫得瞭ACP基因的cDNA剋隆.該序列開放讀碼框全長429 bp,編碼142箇氨基痠,等電點為5.04,具有4'-燐痠汎酰巰基乙胺(4'-PP)的結閤位點.利用BamH Ⅰ/Hind Ⅲ雙酶切,併連接到原覈錶達載體pET-30a,構建瞭pET-30a/acp錶達載體,轉化宿主菌E.coll BL21(DE3),IPTG誘導錶達.SDS-PAGE分析錶明該蛋白得到高效錶達.
ACP(Acyl carrier protein,선기재체단백)삼여고도불포화지방산적PKS(Polyketide synthase)생물합성도경.종Schizochytrium sp.FJU-512 cDNA문고중획득료ACP기인적cDNA극륭.해서렬개방독마광전장429 bp,편마142개안기산,등전점위5.04,구유4'-린산범선구기을알(4'-PP)적결합위점.이용BamH Ⅰ/Hind Ⅲ쌍매절,병련접도원핵표체재체pET-30a,구건료pET-30a/acp표체재체,전화숙주균E.coll BL21(DE3),IPTG유도표체.SDS-PAGE분석표명해단백득도고효표체.