生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2009年
1期
59-61
,共3页
朱恒奇%袁小龙%徐秀英%黄培堂
硃恆奇%袁小龍%徐秀英%黃培堂
주항기%원소룡%서수영%황배당
重组人红细胞生成素%生物反应器%大规模高表达培养
重組人紅細胞生成素%生物反應器%大規模高錶達培養
중조인홍세포생성소%생물반응기%대규모고표체배양
目的:用填充床生物反应器培养表达重组人红细胞生成素的工程细胞株C2W,使其达到高密度高表达.方法:将工程细胞株用含5%小牛血清的DF培养基复苏放大培养,当细胞达到109时,接种到5 L生物反应器中,先用含血清培养基生长培养,再换为无血清培养基表达培养;在整个培养过程中,采用流加方式连续培养,每日采样测定培养上清中葡萄糖浓度,隔日测定细胞的表达水平.结果:接种量约为109细胞;细胞罐培养57 d,包括含血清生长培养6 d,无血清表达培养51 d;重组人红细胞生成素平均表达水平为5 636 U/mL,最高时达7 880 U/mL;收集无血清培养上清476 L,平均每日灌流量8.3 L,最高时达12 L/日.结论:在适当的条件下,利用填充床生物反应器可使工程细胞株的培养达到长时闻、高表达.
目的:用填充床生物反應器培養錶達重組人紅細胞生成素的工程細胞株C2W,使其達到高密度高錶達.方法:將工程細胞株用含5%小牛血清的DF培養基複囌放大培養,噹細胞達到109時,接種到5 L生物反應器中,先用含血清培養基生長培養,再換為無血清培養基錶達培養;在整箇培養過程中,採用流加方式連續培養,每日採樣測定培養上清中葡萄糖濃度,隔日測定細胞的錶達水平.結果:接種量約為109細胞;細胞罐培養57 d,包括含血清生長培養6 d,無血清錶達培養51 d;重組人紅細胞生成素平均錶達水平為5 636 U/mL,最高時達7 880 U/mL;收集無血清培養上清476 L,平均每日灌流量8.3 L,最高時達12 L/日.結論:在適噹的條件下,利用填充床生物反應器可使工程細胞株的培養達到長時聞、高錶達.
목적:용전충상생물반응기배양표체중조인홍세포생성소적공정세포주C2W,사기체도고밀도고표체.방법:장공정세포주용함5%소우혈청적DF배양기복소방대배양,당세포체도109시,접충도5 L생물반응기중,선용함혈청배양기생장배양,재환위무혈청배양기표체배양;재정개배양과정중,채용류가방식련속배양,매일채양측정배양상청중포도당농도,격일측정세포적표체수평.결과:접충량약위109세포;세포관배양57 d,포괄함혈청생장배양6 d,무혈청표체배양51 d;중조인홍세포생성소평균표체수평위5 636 U/mL,최고시체7 880 U/mL;수집무혈청배양상청476 L,평균매일관류량8.3 L,최고시체12 L/일.결론:재괄당적조건하,이용전충상생물반응기가사공정세포주적배양체도장시문、고표체.