CAJ | 학술논문

背景:目前对几种脱细胞方法的效果各家观点不同.大都认为各种方法均可去除细胞,但实验结果却有较大差异.目的:对比胰蛋白酶法、十二烷基硫酸钠法和去氧胆酸钠法去除细胞后心脏瓣膜形态学及生物力学特征.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-10/2008-07在上海交通大学医学院细胞生物学实验室和上海交通大学医学院附属新华医院进行. 材料:40个新鲜猪主动脉瓣120片瓣叶分为3组,分别为胰蛋白酶组、十二烷基硫酸钠组和去氧胆酸钠组,每组40片.方法:胰蛋白酶消化法:置于0.5 g/L胰蛋白酶和0.2 g/L乙二胺四乙酸,在37℃,体积分数为0.05CO2培养箱中振荡24 h.十二烷基硫酸钠法:置于0.3 g/L十二烷基硫酸钠和DNase,RNase中持续振荡24h.去氧胆酸钠法:首先在5 g/L Triton-x 100,5 g/L去氧胆酸钠,0.2 g/L乙二胺四乙酸中振荡24 h,然后在2.5 g/L Triton-X 100,2.5 g/L去氧胆酸钠和0.2 g/L乙二胺四乙酸中破膜去污振荡48 h,两阶段均加入DNase,RNase.主要观察指标:3种方法去细胞前后心脏瓣膜的生物力学特性变化.3种方法去除细胞程度和对胶原纤维、弹力纤维的影响.结果:去氧胆酸钠组拉伸率、最大拉伸应力、最大载荷均高于十二烷基硫酸钠组和胰蛋白酶组(P＜0.01).胰蛋白酶法脱细胞效果差,对基质破坏明显:十二烷基硫酸钠法可完全脱细胞,对基质破坏较大;去氧胆酸钠法完全脱细胞同时对基质破坏较少.结论:与胰蛋白酶法、十二烷基硫酸钠法比较,去氧胆酸钠法脱细胞效果好,能更好保护基质.
배경:목전대궤충탈세포방법적효과각가관점불동.대도인위각충방법균가거제세포,단실험결과각유교대차이.목적:대비이단백매법、십이완기류산납법화거양담산납법거제세포후심장판막형태학급생물역학특정.설계、시간급지점:대비관찰실험,우2007-10/2008-07재상해교통대학의학원세포생물학실험실화상해교통대학의학원부속신화의원진행. 재료:40개신선저주동맥판120편판협분위3조,분별위이단백매조、십이완기류산납조화거양담산납조,매조40편.방법:이단백매소화법:치우0.5 g/L이단백매화0.2 g/L을이알사을산,재37℃,체적분수위0.05CO2배양상중진탕24 h.십이완기류산납법:치우0.3 g/L십이완기류산납화DNase,RNase중지속진탕24h.거양담산납법:수선재5 g/L Triton-x 100,5 g/L거양담산납,0.2 g/L을이알사을산중진탕24 h,연후재2.5 g/L Triton-X 100,2.5 g/L거양담산납화0.2 g/L을이알사을산중파막거오진탕48 h,량계단균가입DNase,RNase.주요관찰지표:3충방법거세포전후심장판막적생물역학특성변화.3충방법거제세포정도화대효원섬유、탄력섬유적영향.결과:거양담산납조랍신솔、최대랍신응력、최대재하균고우십이완기류산납조화이단백매조(P＜0.01).이단백매법탈세포효과차,대기질파배명현:십이완기류산납법가완전탈세포,대기질파배교대;거양담산납법완전탈세포동시대기질파배교소.결론:여이단백매법、십이완기류산납법비교,거양담산납법탈세포효과호,능경호보호기질.