军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2009年
3期
231-233
,共3页
易绍琼%任声权%于婷%张晓艳%刘树玲%陈薇
易紹瓊%任聲權%于婷%張曉豔%劉樹玲%陳薇
역소경%임성권%우정%장효염%류수령%진미
半乳糖凝集素%原核表达%蛋白纯化%红细胞凝集试验
半乳糖凝集素%原覈錶達%蛋白純化%紅細胞凝集試驗
반유당응집소%원핵표체%단백순화%홍세포응집시험
目的:获得重组人半乳糖凝集素-1(galectin-1)蛋白,并分析其生物学活性.方法:PCR方法扩增目的基因,将其克隆到原核表达载体pET21a(+),获得重组质粒pET-galectin;将其转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导,获得目的蛋白的表达;采用Ni-NTA亲和层析柱对目的蛋白进行纯化,用红细胞凝集试验分析其生物学活性.结果与结论:成功构建重组原核表达质粒pET-galectin,目的蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,经Ni-NTA亲和层析柱一步纯化后,得到的蛋白纯度可达80%以上.红细胞凝集试验结果表明获得的重组蛋白具有较好的生物学活性,可进一步用于半乳糖凝集素-1功能研究.
目的:穫得重組人半乳糖凝集素-1(galectin-1)蛋白,併分析其生物學活性.方法:PCR方法擴增目的基因,將其剋隆到原覈錶達載體pET21a(+),穫得重組質粒pET-galectin;將其轉化至錶達宿主菌BL21(DE3)中,用IPTG進行誘導,穫得目的蛋白的錶達;採用Ni-NTA親和層析柱對目的蛋白進行純化,用紅細胞凝集試驗分析其生物學活性.結果與結論:成功構建重組原覈錶達質粒pET-galectin,目的蛋白在大腸桿菌中穫得高效錶達,經Ni-NTA親和層析柱一步純化後,得到的蛋白純度可達80%以上.紅細胞凝集試驗結果錶明穫得的重組蛋白具有較好的生物學活性,可進一步用于半乳糖凝集素-1功能研究.
목적:획득중조인반유당응집소-1(galectin-1)단백,병분석기생물학활성.방법:PCR방법확증목적기인,장기극륭도원핵표체재체pET21a(+),획득중조질립pET-galectin;장기전화지표체숙주균BL21(DE3)중,용IPTG진행유도,획득목적단백적표체;채용Ni-NTA친화층석주대목적단백진행순화,용홍세포응집시험분석기생물학활성.결과여결론:성공구건중조원핵표체질립pET-galectin,목적단백재대장간균중획득고효표체,경Ni-NTA친화층석주일보순화후,득도적단백순도가체80%이상.홍세포응집시험결과표명획득적중조단백구유교호적생물학활성,가진일보용우반유당응집소-1공능연구.
