华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2010年
3期
19-22
,共4页
邬成业%王爱萍%郝慧芳%史平玲%游雷鸣%李培培%张改平
鄔成業%王愛萍%郝慧芳%史平玲%遊雷鳴%李培培%張改平
오성업%왕애평%학혜방%사평령%유뢰명%리배배%장개평
禽流感病毒%H5 亚型%核衣壳蛋白(NP)%原核表达
禽流感病毒%H5 亞型%覈衣殼蛋白(NP)%原覈錶達
금류감병독%H5 아형%핵의각단백(NP)%원핵표체
参考GenBank上H5N1亚型禽流感病毒(AIV) 的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计引物,PCR扩增NP基因,对其进行序列分析并构建分子进化树.将克隆的NP基因插入原核表达载体pET32a,在大肠杆菌中进行诱导表达,对诱导表达的NP重组蛋白进行纯化、Western-Blot鉴定及免疫原性分析.结果表明,克隆的NP基因与GenBank上发表的另外2个河南AIV毒株亲缘关系较近,诱导表达的NP重组蛋白主要以可溶性形式存在,分子量约为70 kDa,并且能够与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性.
參攷GenBank上H5N1亞型禽流感病毒(AIV) 的覈衣殼蛋白(NP)基因序列設計引物,PCR擴增NP基因,對其進行序列分析併構建分子進化樹.將剋隆的NP基因插入原覈錶達載體pET32a,在大腸桿菌中進行誘導錶達,對誘導錶達的NP重組蛋白進行純化、Western-Blot鑒定及免疫原性分析.結果錶明,剋隆的NP基因與GenBank上髮錶的另外2箇河南AIV毒株親緣關繫較近,誘導錶達的NP重組蛋白主要以可溶性形式存在,分子量約為70 kDa,併且能夠與H5亞型AIV暘性血清髮生特異性反應,具有良好的抗原性.
삼고GenBank상H5N1아형금류감병독(AIV) 적핵의각단백(NP)기인서렬설계인물,PCR확증NP기인,대기진행서렬분석병구건분자진화수.장극륭적NP기인삽입원핵표체재체pET32a,재대장간균중진행유도표체,대유도표체적NP중조단백진행순화、Western-Blot감정급면역원성분석.결과표명,극륭적NP기인여GenBank상발표적령외2개하남AIV독주친연관계교근,유도표체적NP중조단백주요이가용성형식존재,분자량약위70 kDa,병차능구여H5아형AIV양성혈청발생특이성반응,구유량호적항원성.
