蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2010年
6期
1017-1021
,共5页
桑树花叶型萎缩病%类似类病毒小分子RNA%溶解性%往返聚丙烯酰胺凝胶电泳
桑樹花葉型萎縮病%類似類病毒小分子RNA%溶解性%往返聚丙烯酰胺凝膠電泳
상수화협형위축병%유사류병독소분자RNA%용해성%왕반취병희선알응효전영
为了能有效检测桑树中的类似类病毒小分子RNA(mscRNA),给解明mscRNA与桑树花叶型萎缩病发生的关系提供依据,以来自不同蚕区和不同季节发病桑园中的桑树花叶型萎缩病病株叶片为材料,采用LiCl法和DEAE纤维素柱层析法分别提取病叶组织中的mscRNA,然后利用往返聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-PAGE)进行检测鉴定,并对mscRNA在2 mol/L LiCl溶液中的溶解性及该检测方法的灵敏度进行分析.结果显示:采用LiCl法和DEAE纤维素柱层析法都可以有效地提取阳性材料中含有的mscRNA;在溶解及不溶于2 mol/L LiCl的阳性材料RNA样品中均含有丰富的mscRNA,mscRNA在LiCl溶液中的溶解性与已知类病毒的溶解性有很大的差异;当提取的病桑叶片组织总RNA量为480 ng时,通过Return-PAGE可以检测到mscRNA,当总RNA量≤96 ng时,已检测不到其中含有的mscRNA;在36株发病植株的叶片总RNA样品中,有7个样品检测出含有mscRNA,检出率约19%,在一些病症明显的植株样品中未检测出mscRNA,而在一些病症较轻的植株样品中却检测出mscRNA.检测结果提示:mscRNA与桑树花叶型萎缩病症的表现没有表现出明显的关联.
為瞭能有效檢測桑樹中的類似類病毒小分子RNA(mscRNA),給解明mscRNA與桑樹花葉型萎縮病髮生的關繫提供依據,以來自不同蠶區和不同季節髮病桑園中的桑樹花葉型萎縮病病株葉片為材料,採用LiCl法和DEAE纖維素柱層析法分彆提取病葉組織中的mscRNA,然後利用往返聚丙烯酰胺凝膠電泳(Return-PAGE)進行檢測鑒定,併對mscRNA在2 mol/L LiCl溶液中的溶解性及該檢測方法的靈敏度進行分析.結果顯示:採用LiCl法和DEAE纖維素柱層析法都可以有效地提取暘性材料中含有的mscRNA;在溶解及不溶于2 mol/L LiCl的暘性材料RNA樣品中均含有豐富的mscRNA,mscRNA在LiCl溶液中的溶解性與已知類病毒的溶解性有很大的差異;噹提取的病桑葉片組織總RNA量為480 ng時,通過Return-PAGE可以檢測到mscRNA,噹總RNA量≤96 ng時,已檢測不到其中含有的mscRNA;在36株髮病植株的葉片總RNA樣品中,有7箇樣品檢測齣含有mscRNA,檢齣率約19%,在一些病癥明顯的植株樣品中未檢測齣mscRNA,而在一些病癥較輕的植株樣品中卻檢測齣mscRNA.檢測結果提示:mscRNA與桑樹花葉型萎縮病癥的錶現沒有錶現齣明顯的關聯.
위료능유효검측상수중적유사류병독소분자RNA(mscRNA),급해명mscRNA여상수화협형위축병발생적관계제공의거,이래자불동잠구화불동계절발병상완중적상수화협형위축병병주협편위재료,채용LiCl법화DEAE섬유소주층석법분별제취병협조직중적mscRNA,연후이용왕반취병희선알응효전영(Return-PAGE)진행검측감정,병대mscRNA재2 mol/L LiCl용액중적용해성급해검측방법적령민도진행분석.결과현시:채용LiCl법화DEAE섬유소주층석법도가이유효지제취양성재료중함유적mscRNA;재용해급불용우2 mol/L LiCl적양성재료RNA양품중균함유봉부적mscRNA,mscRNA재LiCl용액중적용해성여이지류병독적용해성유흔대적차이;당제취적병상협편조직총RNA량위480 ng시,통과Return-PAGE가이검측도mscRNA,당총RNA량≤96 ng시,이검측불도기중함유적mscRNA;재36주발병식주적협편총RNA양품중,유7개양품검측출함유mscRNA,검출솔약19%,재일사병증명현적식주양품중미검측출mscRNA,이재일사병증교경적식주양품중각검측출mscRNA.검측결과제시:mscRNA여상수화협형위축병증적표현몰유표현출명현적관련.
