羊布鲁菌外膜蛋白omp2b的克隆原核表达及纯化
양포로균외막단백omp2b적극륭원핵표체급순화
Construction, Expression and Purification of Gene Encoding omp2bProtein of Brucella Melitensis in Prokaryotic Cell
  • 万方数据
    科学技术与工程 과학기술여공정
    SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
    2011年 35期 8705-8710 ,共6页

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    羊布鲁菌%omp2b蛋白%克隆%表达%纯化 羊佈魯菌%omp2b蛋白%剋隆%錶達%純化
    양포로균%omp2b단백%극륭%표체%순화
    研究羊布鲁菌外膜蛋白omp2b基因的克隆,原核表达,以及纯化.根据羊布鲁菌M5株外膜蛋白omp2b蛋白基因序列设计引物,扩增出大小约为1 130 bp的目的基因片断,克隆入融合表达载体pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-omp2b.在大肠埃希菌中将该蛋白表达并用亲和层析法纯化.用Western-blot分析方法鉴定纯化蛋白.结果成功构建了pGEX-4T-1 -omp2b原核表达载体并在大肠埃希菌中表达了omp2b基因,纯化后所获得的蛋白与目的蛋白大小一致且与兔抗布鲁菌血清发生特异性反应,说明其为布鲁菌omp2b蛋白.本研究成功构建了pGEX-4T-1 -omp2b原核表达载体,并且在大肠埃希菌中进行表达,纯化的omp2b蛋白具有良好的免疫原性.
    연구양포로균외막단백omp2b기인적극륭,원핵표체,이급순화.근거양포로균M5주외막단백omp2b단백기인서렬설계인물,확증출대소약위1 130 bp적목적기인편단,극륭입융합표체재체pGEX-4T-1,구건중조질립pGEX-4T-1-omp2b.재대장애희균중장해단백표체병용친화층석법순화.용Western-blot분석방법감정순화단백.결과성공구건료pGEX-4T-1 -omp2b원핵표체재체병재대장애희균중표체료omp2b기인,순화후소획득적단백여목적단백대소일치차여토항포로균혈청발생특이성반응,설명기위포로균omp2b단백.본연구성공구건료pGEX-4T-1 -omp2b원핵표체재체,병차재대장애희균중진행표체,순화적omp2b단백구유량호적면역원성.
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