中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
27期
189-193
,共5页
刘娜%刘兴地%李明芳%郑学勤
劉娜%劉興地%李明芳%鄭學勤
류나%류흥지%리명방%정학근
INO启动子%植物表达载体%载体构建
INO啟動子%植物錶達載體%載體構建
INO계동자%식물표체재체%재체구건
为了观察转基因植株胚珠特异性表达,采用CTAB法提取拟南芥基因组DNA,构建了35S::pCAMBIA1304-L117载体并对番茄进行遗传转化.根据已报道的INO启动子序列设计并合成一对特异引物,通过PCR对启动子进行扩增、连接并对其进行测序,结果表明:与GenBank中已注册的INO启动子序列的同源性为100％,并且构建了以INO代替CAMV35S启动子的pCAMBIA 1304-L 117植物表达载体,采用冷冻法将其转入根癌农杆菌EHA105.成功构建了35S::pCAMBIA1304-L117载体,并为进一步检测奠定了基础.
為瞭觀察轉基因植株胚珠特異性錶達,採用CTAB法提取擬南芥基因組DNA,構建瞭35S::pCAMBIA1304-L117載體併對番茄進行遺傳轉化.根據已報道的INO啟動子序列設計併閤成一對特異引物,通過PCR對啟動子進行擴增、連接併對其進行測序,結果錶明:與GenBank中已註冊的INO啟動子序列的同源性為100％,併且構建瞭以INO代替CAMV35S啟動子的pCAMBIA 1304-L 117植物錶達載體,採用冷凍法將其轉入根癌農桿菌EHA105.成功構建瞭35S::pCAMBIA1304-L117載體,併為進一步檢測奠定瞭基礎.
위료관찰전기인식주배주특이성표체,채용CTAB법제취의남개기인조DNA,구건료35S::pCAMBIA1304-L117재체병대번가진행유전전화.근거이보도적INO계동자서렬설계병합성일대특이인물,통과PCR대계동자진행확증、련접병대기진행측서,결과표명:여GenBank중이주책적INO계동자서렬적동원성위100％,병차구건료이INO대체CAMV35S계동자적pCAMBIA 1304-L 117식물표체재체,채용냉동법장기전입근암농간균EHA105.성공구건료35S::pCAMBIA1304-L117재체,병위진일보검측전정료기출.
