生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2005年
1期
58-65
,共8页
魏岳荣%黄学林%李佳%黄霞%李哲%李筱菊
魏嶽榮%黃學林%李佳%黃霞%李哲%李篠菊
위악영%황학림%리가%황하%리철%리소국
香蕉%雄花序%胚性细胞悬浮系%体细胞胚%植株再生
香蕉%雄花序%胚性細胞懸浮繫%體細胞胚%植株再生
향초%웅화서%배성세포현부계%체세포배%식주재생
鲜食蕉品种的高度不育性和多倍性制约了用传统育种方法培育生产实践中所需的新品种,建立稳定的胚性细胞悬浮系是香蕉生物技术育种的前提.以目前国内尚未建立该体系的鲜食蕉品种贡蕉(AA)未成熟雄花序的第1~15位花梳为外植体,对胚性细胞悬浮系的建立和植株再生体系进行了优化.结果表明,5~6个月的培养后可获得分生小球体和浅黄色、松散易碎的胚性愈伤组织.9μmol/L 2,4-D对外植体愈伤组织的诱导效果最好,诱导率为40.96%,胚性愈伤组织诱导率可达7.45%,其中5.79%的胚性愈伤组织来源于第6~12号位置的花梳.胚性愈伤组织悬浮培养后,通过3个月的筛选和继代培养,可得到均质的胚性细胞悬浮系.该培养体系合适继代周期为15d,继代时合适的起始接种量为每30mL培养基加2 mL PCVECS.培养6个月的胚性细胞在体细胞胚诱导培养基中培养15d后可见到白色半透明体细胞胚的发生,体细胞胚诱导率为280×103个/mL PCV.成熟体细胞胚的萌发率为17.28%,其中发育成正常的再生植株的百分率为14.16%.
鮮食蕉品種的高度不育性和多倍性製約瞭用傳統育種方法培育生產實踐中所需的新品種,建立穩定的胚性細胞懸浮繫是香蕉生物技術育種的前提.以目前國內尚未建立該體繫的鮮食蕉品種貢蕉(AA)未成熟雄花序的第1~15位花梳為外植體,對胚性細胞懸浮繫的建立和植株再生體繫進行瞭優化.結果錶明,5~6箇月的培養後可穫得分生小毬體和淺黃色、鬆散易碎的胚性愈傷組織.9μmol/L 2,4-D對外植體愈傷組織的誘導效果最好,誘導率為40.96%,胚性愈傷組織誘導率可達7.45%,其中5.79%的胚性愈傷組織來源于第6~12號位置的花梳.胚性愈傷組織懸浮培養後,通過3箇月的篩選和繼代培養,可得到均質的胚性細胞懸浮繫.該培養體繫閤適繼代週期為15d,繼代時閤適的起始接種量為每30mL培養基加2 mL PCVECS.培養6箇月的胚性細胞在體細胞胚誘導培養基中培養15d後可見到白色半透明體細胞胚的髮生,體細胞胚誘導率為280×103箇/mL PCV.成熟體細胞胚的萌髮率為17.28%,其中髮育成正常的再生植株的百分率為14.16%.
선식초품충적고도불육성화다배성제약료용전통육충방법배육생산실천중소수적신품충,건립은정적배성세포현부계시향초생물기술육충적전제.이목전국내상미건립해체계적선식초품충공초(AA)미성숙웅화서적제1~15위화소위외식체,대배성세포현부계적건립화식주재생체계진행료우화.결과표명,5~6개월적배양후가획득분생소구체화천황색、송산역쇄적배성유상조직.9μmol/L 2,4-D대외식체유상조직적유도효과최호,유도솔위40.96%,배성유상조직유도솔가체7.45%,기중5.79%적배성유상조직래원우제6~12호위치적화소.배성유상조직현부배양후,통과3개월적사선화계대배양,가득도균질적배성세포현부계.해배양체계합괄계대주기위15d,계대시합괄적기시접충량위매30mL배양기가2 mL PCVECS.배양6개월적배성세포재체세포배유도배양기중배양15d후가견도백색반투명체세포배적발생,체세포배유도솔위280×103개/mL PCV.성숙체세포배적맹발솔위17.28%,기중발육성정상적재생식주적백분솔위14.16%.