生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2005年
5期
692-697
,共6页
段金柱%齐财%韩伟%王战会%靳刚%阎锡蕴
段金柱%齊財%韓偉%王戰會%靳剛%閻錫蘊
단금주%제재%한위%왕전회%근강%염석온
单链抗体%原核表达%包涵体%复性%SARS-CoV
單鏈抗體%原覈錶達%包涵體%複性%SARS-CoV
단련항체%원핵표체%포함체%복성%SARS-CoV
从SARS免疫抗体库获得的一株抗SARS-CoV人源单链抗体H12,亟待鉴定.为了快速制备大量具有生物活性的单链抗体H12,构建了pET28a-H12原核高表达载体,表达量占菌体总蛋白质30%以上.采用稀释复性和分子筛柱复性两种方法对包涵体蛋白进行复性与纯化,结果显示两种方法都能使得单链抗体复性.与稀释复性法相比,柱复性效果更好,其抗原结合活性是稀释复性法的1.51倍.柱复性后的单链抗体亲和力测定的解离常数Kd为73.5nmol/mL.为进一步研究单链抗体H12的功能奠定了基础.
從SARS免疫抗體庫穫得的一株抗SARS-CoV人源單鏈抗體H12,亟待鑒定.為瞭快速製備大量具有生物活性的單鏈抗體H12,構建瞭pET28a-H12原覈高錶達載體,錶達量佔菌體總蛋白質30%以上.採用稀釋複性和分子篩柱複性兩種方法對包涵體蛋白進行複性與純化,結果顯示兩種方法都能使得單鏈抗體複性.與稀釋複性法相比,柱複性效果更好,其抗原結閤活性是稀釋複性法的1.51倍.柱複性後的單鏈抗體親和力測定的解離常數Kd為73.5nmol/mL.為進一步研究單鏈抗體H12的功能奠定瞭基礎.
종SARS면역항체고획득적일주항SARS-CoV인원단련항체H12,극대감정.위료쾌속제비대량구유생물활성적단련항체H12,구건료pET28a-H12원핵고표체재체,표체량점균체총단백질30%이상.채용희석복성화분자사주복성량충방법대포함체단백진행복성여순화,결과현시량충방법도능사득단련항체복성.여희석복성법상비,주복성효과경호,기항원결합활성시희석복성법적1.51배.주복성후적단련항체친화력측정적해리상수Kd위73.5nmol/mL.위진일보연구단련항체H12적공능전정료기출.
