目的:观察横断大鼠穹窿海马伞后室管膜下区神经前体细胞的变化情况.方法:实验于1999-01/2000-03在中山大学医学院解剖教研室完成,3个月龄健康雄性SD大鼠68只,随机分成正常组4只,损伤组和损伤对照组分别按术后存活时间分为1,3,5,7,10,15,20和30 d组,每组各4只.开颅制作动物模型,损伤组横向切断右半侧穹窿海马伞;损伤对照组横向切断穹窿海马伞上方的皮质和胼胝体.正常组腹腔注射5-嗅-2-脱氧尿嘧啶50 mg/kg 3次,每次间隔4 h,于末次注射后12 h处死动物;损伤组和损伤对照组于手术后第1,3,5,7,10,15,20和30天腹腔注射5-嗅-2-脱氧尿嘧啶(50 mg/kg)3次,每次间隔4 h,于末次注射后12 h处死动物.用4%的多聚甲醛固定液经左心室灌注固定.冰冻切片机进行连续冠状切片,片厚40μm.4套相邻切片分别用于5-嗅-2-脱氧尿嘧啶免疫组织化学染色以及5-嗅-2-脱氧尿嘧啶和Nestin以及胶质纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学双标染色. 结果:①正常组前脑室管膜下区含有少量的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞,主要分布在室管膜下区背外侧角,细胞核为圆形或椭圆形,免疫组织化学染色较浅.②损伤组损伤侧前脑室管膜下区的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞显著增加.损伤后第1天,室管膜下区的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞变化不明显.第3天,室管膜下区的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞开始增加.第5天,内侧壁的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞显著增加,细胞排列密集,层数增加,细胞核染色加深.第10天,背外侧角的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞显著增加,细胞核大小不均、深染.从损伤后第13天起,室管膜下区的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞逐渐减少,到第30天室管膜下区的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞的情况与正常组相同.损伤对侧的室管膜下区的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞只有少量的增加.③从损伤后第10天起,在前脑损伤侧室管膜下区背外侧角外上方的胼胝体中可见一些5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞,免疫组织化学双标染色显示为5-嗅-2-脱氧尿嘧啶和Nestin染色阳性,5-嗅-2-脱氧尿嘧啶和胶质纤维酸性蛋白或神经元特异性烯醇化酶染色阴性.损伤后第15天,在前脑和损伤平面之间的冠状切面上,背外侧角外上方的胼胝体中仍见一些5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞.损伤后第20天,在损伤切面上,在室管膜下区上方靠近损伤区的胼胝体中可见一些5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞,细胞核呈梭形,长轴与横行的胼胝体纤维一致,并已有部分细胞进入损伤区.④损伤对照组损伤后各时间点损伤区、室管膜下区背外侧角及外侧壁的5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞的变化与损伤组基本相同,但室管膜下区内侧壁未见5-嗅-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞增加的改变.结论:穹窿海马伞损伤诱导室管膜下区神经前体细胞大量增殖,增殖细胞沿胼胝体向损伤区迁移,可能参与脑损伤的修复.
目的:觀察橫斷大鼠穹窿海馬傘後室管膜下區神經前體細胞的變化情況.方法:實驗于1999-01/2000-03在中山大學醫學院解剖教研室完成,3箇月齡健康雄性SD大鼠68隻,隨機分成正常組4隻,損傷組和損傷對照組分彆按術後存活時間分為1,3,5,7,10,15,20和30 d組,每組各4隻.開顱製作動物模型,損傷組橫嚮切斷右半側穹窿海馬傘;損傷對照組橫嚮切斷穹窿海馬傘上方的皮質和胼胝體.正常組腹腔註射5-嗅-2-脫氧尿嘧啶50 mg/kg 3次,每次間隔4 h,于末次註射後12 h處死動物;損傷組和損傷對照組于手術後第1,3,5,7,10,15,20和30天腹腔註射5-嗅-2-脫氧尿嘧啶(50 mg/kg)3次,每次間隔4 h,于末次註射後12 h處死動物.用4%的多聚甲醛固定液經左心室灌註固定.冰凍切片機進行連續冠狀切片,片厚40μm.4套相鄰切片分彆用于5-嗅-2-脫氧尿嘧啶免疫組織化學染色以及5-嗅-2-脫氧尿嘧啶和Nestin以及膠質纖維痠性蛋白、神經元特異性烯醇化酶免疫組織化學雙標染色. 結果:①正常組前腦室管膜下區含有少量的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞,主要分佈在室管膜下區揹外側角,細胞覈為圓形或橢圓形,免疫組織化學染色較淺.②損傷組損傷側前腦室管膜下區的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞顯著增加.損傷後第1天,室管膜下區的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞變化不明顯.第3天,室管膜下區的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞開始增加.第5天,內側壁的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞顯著增加,細胞排列密集,層數增加,細胞覈染色加深.第10天,揹外側角的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞顯著增加,細胞覈大小不均、深染.從損傷後第13天起,室管膜下區的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞逐漸減少,到第30天室管膜下區的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞的情況與正常組相同.損傷對側的室管膜下區的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞隻有少量的增加.③從損傷後第10天起,在前腦損傷側室管膜下區揹外側角外上方的胼胝體中可見一些5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞,免疫組織化學雙標染色顯示為5-嗅-2-脫氧尿嘧啶和Nestin染色暘性,5-嗅-2-脫氧尿嘧啶和膠質纖維痠性蛋白或神經元特異性烯醇化酶染色陰性.損傷後第15天,在前腦和損傷平麵之間的冠狀切麵上,揹外側角外上方的胼胝體中仍見一些5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞.損傷後第20天,在損傷切麵上,在室管膜下區上方靠近損傷區的胼胝體中可見一些5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞,細胞覈呈梭形,長軸與橫行的胼胝體纖維一緻,併已有部分細胞進入損傷區.④損傷對照組損傷後各時間點損傷區、室管膜下區揹外側角及外側壁的5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞的變化與損傷組基本相同,但室管膜下區內側壁未見5-嗅-2-脫氧尿嘧啶暘性細胞增加的改變.結論:穹窿海馬傘損傷誘導室管膜下區神經前體細胞大量增殖,增殖細胞沿胼胝體嚮損傷區遷移,可能參與腦損傷的脩複.
목적:관찰횡단대서궁륭해마산후실관막하구신경전체세포적변화정황.방법:실험우1999-01/2000-03재중산대학의학원해부교연실완성,3개월령건강웅성SD대서68지,수궤분성정상조4지,손상조화손상대조조분별안술후존활시간분위1,3,5,7,10,15,20화30 d조,매조각4지.개로제작동물모형,손상조횡향절단우반측궁륭해마산;손상대조조횡향절단궁륭해마산상방적피질화변지체.정상조복강주사5-후-2-탈양뇨밀정50 mg/kg 3차,매차간격4 h,우말차주사후12 h처사동물;손상조화손상대조조우수술후제1,3,5,7,10,15,20화30천복강주사5-후-2-탈양뇨밀정(50 mg/kg)3차,매차간격4 h,우말차주사후12 h처사동물.용4%적다취갑철고정액경좌심실관주고정.빙동절편궤진행련속관상절편,편후40μm.4투상린절편분별용우5-후-2-탈양뇨밀정면역조직화학염색이급5-후-2-탈양뇨밀정화Nestin이급효질섬유산성단백、신경원특이성희순화매면역조직화학쌍표염색. 결과:①정상조전뇌실관막하구함유소량적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포,주요분포재실관막하구배외측각,세포핵위원형혹타원형,면역조직화학염색교천.②손상조손상측전뇌실관막하구적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포현저증가.손상후제1천,실관막하구적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포변화불명현.제3천,실관막하구적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포개시증가.제5천,내측벽적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포현저증가,세포배렬밀집,층수증가,세포핵염색가심.제10천,배외측각적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포현저증가,세포핵대소불균、심염.종손상후제13천기,실관막하구적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포축점감소,도제30천실관막하구적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포적정황여정상조상동.손상대측적실관막하구적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포지유소량적증가.③종손상후제10천기,재전뇌손상측실관막하구배외측각외상방적변지체중가견일사5-후-2-탈양뇨밀정양성세포,면역조직화학쌍표염색현시위5-후-2-탈양뇨밀정화Nestin염색양성,5-후-2-탈양뇨밀정화효질섬유산성단백혹신경원특이성희순화매염색음성.손상후제15천,재전뇌화손상평면지간적관상절면상,배외측각외상방적변지체중잉견일사5-후-2-탈양뇨밀정양성세포.손상후제20천,재손상절면상,재실관막하구상방고근손상구적변지체중가견일사5-후-2-탈양뇨밀정양성세포,세포핵정사형,장축여횡행적변지체섬유일치,병이유부분세포진입손상구.④손상대조조손상후각시간점손상구、실관막하구배외측각급외측벽적5-후-2-탈양뇨밀정양성세포적변화여손상조기본상동,단실관막하구내측벽미견5-후-2-탈양뇨밀정양성세포증가적개변.결론:궁륭해마산손상유도실관막하구신경전체세포대량증식,증식세포연변지체향손상구천이,가능삼여뇌손상적수복.
