CAJ | 학술논문

背景与目的:趋化因子受体在多种病理过程中发挥重要作用,通过促进肿瘤细胞增殖、迁移或血管生成过程,进而在肿瘤发生、演进和转移中发挥极为重要的作用.本研究拟探讨甲酰化肽受体(formylpeptide receptor,FPR)在人恶性胶质瘤细胞中的表达和激活后的功能活性.方法:以人恶性胶质瘤细胞U87和FPR-siRNA-U87细胞为研究对象,采用间接免疫荧光标记、激光共聚焦扫描显微术观测人恶性胶质瘤细胞FPR的表达和定位;用FPR配体甲酰-甲硫酰-亮氨酰-苯丙氨酰胺(formy-Met-Leu-Phe,fMLF)激活FPR后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,双抗夹心酶联免疫(ELISA)吸附法检测细胞分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)水平,RT-PCR法检测细胞IL-8 mRNA的水平.结果:恶性胶质瘤细胞U87有FPR表达,定位于细胞膜,FPR-siRNA-U87细胞不表达FPR:FPR激动剂fMLF对人恶性胶质瘤细胞具有明显的促增殖作用,U87细胞fMLF刺激组A值较对照组显著升高(P＜0.05),FPR-siRNA-U87细胞fMLF刺激组A值与对照组相比无显著性差异(P＞0.05);fMLF作为FPR的激动剂,在12 h、24 h、36 h和48 h等各时相点U87细胞的VEGF和IL-8蛋白水平均显著增加,以处理36 h为观察时间点,U87细胞VEGF蛋白水平[(3.13±0.23)ng/ml]较对照组显著增加(P＜0.05),IL-8蛋白分泌量为(7.54±0.53)ng/ml,较对照组显著增加(P＜0.05);FPR-siRNA-U87细胞VEGF和IL-8蛋白分泌量分别为(1.26±0.05)ng/ml和(1.54±0.05)ng/ml,较对照组无明显改变(P＞0.05);fMLF能显著上调U87细胞IL-8 mRNA的表达,较对照组显著升高(P＜0.05),FPR-siRNA-U87细胞IL-8 mRNA水平与对照组相比无显著性差异(P＞0.05).结论:人恶性胶质瘤细胞膜存在功能性FPR受体,其活化后具有促瘤细胞增殖和分泌血管生成因子的作用.
배경여목적:추화인자수체재다충병리과정중발휘중요작용,통과촉진종류세포증식、천이혹혈관생성과정,진이재종류발생、연진화전이중발휘겁위중요적작용.본연구의탐토갑선화태수체(formylpeptide receptor,FPR)재인악성효질류세포중적표체화격활후적공능활성.방법:이인악성효질류세포U87화FPR-siRNA-U87세포위연구대상,채용간접면역형광표기、격광공취초소묘현미술관측인악성효질류세포FPR적표체화정위;용FPR배체갑선-갑류선-량안선-분병안선알(formy-Met-Leu-Phe,fMLF)격활FPR후,채용사갑기우담서람(MTT)법검측세포증식,쌍항협심매련면역(ELISA)흡부법검측세포분비혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)화백세포개소8(interleukin-8,IL-8)수평,RT-PCR법검측세포IL-8 mRNA적수평.결과:악성효질류세포U87유FPR표체,정위우세포막,FPR-siRNA-U87세포불표체FPR:FPR격동제fMLF대인악성효질류세포구유명현적촉증식작용,U87세포fMLF자격조A치교대조조현저승고(P＜0.05),FPR-siRNA-U87세포fMLF자격조A치여대조조상비무현저성차이(P＞0.05);fMLF작위FPR적격동제,재12 h、24 h、36 h화48 h등각시상점U87세포적VEGF화IL-8단백수평균현저증가,이처리36 h위관찰시간점,U87세포VEGF단백수평[(3.13±0.23)ng/ml]교대조조현저증가(P＜0.05),IL-8단백분비량위(7.54±0.53)ng/ml,교대조조현저증가(P＜0.05);FPR-siRNA-U87세포VEGF화IL-8단백분비량분별위(1.26±0.05)ng/ml화(1.54±0.05)ng/ml,교대조조무명현개변(P＞0.05);fMLF능현저상조U87세포IL-8 mRNA적표체,교대조조현저승고(P＜0.05),FPR-siRNA-U87세포IL-8 mRNA수평여대조조상비무현저성차이(P＞0.05).결론:인악성효질류세포막존재공능성FPR수체,기활화후구유촉류세포증식화분비혈관생성인자적작용.