中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2008年
2期
67-70
,共4页
房慧旺%刘庆华%王奎玲%刘庆超%唐启和
房慧旺%劉慶華%王奎玲%劉慶超%唐啟和
방혜왕%류경화%왕규령%류경초%당계화
绣线菊属%DNA提取%RAPD
繡線菊屬%DNA提取%RAPD
수선국속%DNA제취%RAPD
旨在筛选出绣线菊属 RAPD 反应的最佳体系,为绣线菊属植物种质资源遗传多样性和亲缘关系的研究奠定基础.试验以 10 种绣线菊属植物为材料,采用改良 CTAB 法进行冬芽和嫩叶的总 DNA 提取并对影响 RAPD 扩增效果的因素进行优化.通过单因素优化筛选出最佳的 20μl 反应体系:10×Taq buffer 2μl,Taq 酶 1.0U,0.15mmol/L dNTP,DNA 2ng/μl,引物 0.21μ mol/L,Mg2+2.0mmol/L;反应程序:94℃预变性 4min,然后进行 40 个循环:94℃变性 45s,37℃退火 1min,72℃延伸 1min.最后72℃延伸5min,4℃终止反应.结果发现,采用改良 CTAB 法所提取绣线菊冬芽的 DNA 达到 RAPD 反应的要求.筛选体系扩增出清晰稳定的多态性条带,可用于对绣线菊属遗传育种方面的研究.
旨在篩選齣繡線菊屬 RAPD 反應的最佳體繫,為繡線菊屬植物種質資源遺傳多樣性和親緣關繫的研究奠定基礎.試驗以 10 種繡線菊屬植物為材料,採用改良 CTAB 法進行鼕芽和嫩葉的總 DNA 提取併對影響 RAPD 擴增效果的因素進行優化.通過單因素優化篩選齣最佳的 20μl 反應體繫:10×Taq buffer 2μl,Taq 酶 1.0U,0.15mmol/L dNTP,DNA 2ng/μl,引物 0.21μ mol/L,Mg2+2.0mmol/L;反應程序:94℃預變性 4min,然後進行 40 箇循環:94℃變性 45s,37℃退火 1min,72℃延伸 1min.最後72℃延伸5min,4℃終止反應.結果髮現,採用改良 CTAB 法所提取繡線菊鼕芽的 DNA 達到 RAPD 反應的要求.篩選體繫擴增齣清晰穩定的多態性條帶,可用于對繡線菊屬遺傳育種方麵的研究.
지재사선출수선국속 RAPD 반응적최가체계,위수선국속식물충질자원유전다양성화친연관계적연구전정기출.시험이 10 충수선국속식물위재료,채용개량 CTAB 법진행동아화눈협적총 DNA 제취병대영향 RAPD 확증효과적인소진행우화.통과단인소우화사선출최가적 20μl 반응체계:10×Taq buffer 2μl,Taq 매 1.0U,0.15mmol/L dNTP,DNA 2ng/μl,인물 0.21μ mol/L,Mg2+2.0mmol/L;반응정서:94℃예변성 4min,연후진행 40 개순배:94℃변성 45s,37℃퇴화 1min,72℃연신 1min.최후72℃연신5min,4℃종지반응.결과발현,채용개량 CTAB 법소제취수선국동아적 DNA 체도 RAPD 반응적요구.사선체계확증출청석은정적다태성조대,가용우대수선국속유전육충방면적연구.
